携带OPCML基因的慢病毒表达质粒的构建

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目的:建立携带和表达OPCML基因的慢病毒(1entiviral viruses,LV)表达质粒。方法:用内切酶将OPCML基因从已构建的表达质粒pcDNA3-OPCML上切下,插入慢病毒载体pWPI—GFP中,构建慢病毒表达质粒pWPI—OPCML,通过酶切、测序和检测验证OPCML蛋白后,将pWPI—OPCML、pCMV—dR8.74和pMDG共转染包装细胞293T,获得重组慢病毒,再感染靶细胞A2780,通过检测标志蛋白-绿色荧光蛋白(GFP)和目的蛋白OPCML进一步验证pWPI—OPCML在细胞
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