【摘 要】
：
目的:探讨C3a受体(C3a receptor,C3aR)在人壁层肾祖细胞(CD24+CD133+PEC)向足细胞分化中的作用及其机制.方法:分离和培养原代人CD24+CD133+PEC,诱导分化为足细胞并检测C3aR在分化过程中的表达.构建C3a分泌性表达慢病毒,感染CD24+CD133+PEC,获得C3a过表达细胞株(C3a过表达组).检测C3a过表达组、空载体组和未感染组细胞的活力、分化情况及E-cadherin、p-ERK1/2的表达.结果:成功分离出CD24+CD133+PEC并诱导其分化为表达
【机 构】
：
苏州大学附属第一医院肾内科,江苏苏州215000;浙江省台州医院,浙江临海317000
论文部分内容阅读
目的:探讨C3a受体(C3a receptor,C3aR)在人壁层肾祖细胞(CD24+CD133+PEC)向足细胞分化中的作用及其机制.方法:分离和培养原代人CD24+CD133+PEC,诱导分化为足细胞并检测C3aR在分化过程中的表达.构建C3a分泌性表达慢病毒,感染CD24+CD133+PEC,获得C3a过表达细胞株(C3a过表达组).检测C3a过表达组、空载体组和未感染组细胞的活力、分化情况及E-cadherin、p-ERK1/2的表达.结果:成功分离出CD24+CD133+PEC并诱导其分化为表达Wilms肿瘤蛋白1(Wilms tumor protein 1,WT1)的足细胞,C3aR在分化过程中表达显著降低.C3a过表达组的细胞活力较空载体组和未感染组显著增强(P<0.01);诱导分化第2天,C3a过表达组细胞WT1的表达较空载体组和未感染组显著降低(P<0.01),E-cadherin及p-ERK1/2的表达较空载体组和未感染组显著升高(P<0.01).结论:C3aR参与了人CD24+CD133+PEC向足细胞分化的过程,C3a过表达促进CD24+CD133+PEC的增殖并抑制其向足细胞分化,可能是通过ERK1/2信号通路发挥作用的.
其他文献
目的:研究Ras相关蛋白1A(Rap1A)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的ANA-1小鼠腹腔巨噬细胞增殖和M1极化的影响,并探讨其作用机制.方法:体外培养ANA-1细胞,建立高Hcy血症细胞模型,并将细胞分成对照(control)组、Hcy组、Hcy+Rap1A干扰腺病毒(Ad-shRNA/Rap1A)组和Hcy+阴性对照腺病毒(Ad-shRNA/GFP)组.采用CCK-8法和EdU染色检测各组细胞的增殖能力;ELISA检测细胞培养液中炎症因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度;R
目的:探讨孕期运动是否抑制高血压大鼠子代血管重构及其可能的表观遗传机制.方法:选用自发性高血压大鼠(SHR)及其正常血压对照大鼠(WKY),同品系进行配种,见栓且阴道涂片见精子确定为配种成功,记为妊娠第1天.孕鼠随机分为安静(p-WKY-SED和p-SHR-SED)组和运动(p-WKY-EX和p-SHR-EX)组,每组25只.运动组进行无负重游泳运动(每天60 min,每周6 d,至妊娠第19天).每天监测孕鼠进食量和体重;妊娠第21天,一部分孕鼠剖腹取胎鼠监测胎鼠体重和胎盘效率,另一部分孕鼠待自然分娩;
目的:探讨激活α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nAChR)是否通过抑制IκB激酶β/核因子κB(IKKβ/NF-κB)介导的慢性炎症而阻止饮食诱导的肥胖大鼠高血压.方法:高脂(HF)饮食16周诱导肥胖高血压大鼠模型,分为模型对照组(HF con组,n=10)、α7 nAChR激动剂PUN-282987组(PNU组,n=10)和α7 nAChR抑制剂α-银环蛇毒素(α-BGT)+激动剂PUN-282987组(α-BGT+PNU组,n=12),另设空白对照组(NF con组,n=8).PNU组持续6周腹腔注射α
目的:探讨黄芪甲苷(AST)对小鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的作用及机制.方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术(sham)组、I/R组和I/R+AST组,每组20只.sham组小鼠开胸后不结扎左冠状动脉前降支,I/R组和I/R+AST组小鼠行左冠状动脉前降支结扎30 min后再灌注24 h,I/R+AST组小鼠结扎30 min后腹腔注射20 mg/kg AST.采用PowerLab生理记录仪检测小鼠左室内压变化速率(±dp/dtmax),检测小鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶同工酶(CK-M
目的:探讨黄连素(berberine,BBR)对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的大鼠痴呆和Tau蛋白过度磷酸化的作用及机制.方法:36只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组12只.模型组和治疗组大鼠给予尾静脉注射Hcy(400μg·kg-1·d-1)2周,对照组大鼠注射同剂量生理盐水(normal saline,NS);2周后治疗组大鼠用BBR(100 mg·kg-1·d-1)灌胃10周,对照组和模型组大鼠用同体积的NS灌胃.Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学
目的:体外探讨O-连接的N-乙酰葡萄糖胺(O-linked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)修饰调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体对H9c2大鼠心肌细胞缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响及可能的机制.方法:对数生长期的H9c2大鼠心肌细胞感染O-GlcNAc转移酶(O-GlcNAc tr
目的:探讨葛根素(Pue)对高糖(HG)条件下大鼠施万细胞系RSC96炎症损伤的作用.方法:将RSC96细胞随机分为4组:对照(Con)组、HG组、Pue预处理(HG+Pue)组和核因子κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)预处理(HG+PDTC)组.CCK-8法检测细胞活力;Western blot检测凋亡相关分子caspase-3和cleved caspase-3的蛋白水平以确定HG造模的葡萄糖浓度及Pue的最佳作用浓度;ELISA检测白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6的含量;
目的:探讨丹蒌片是否通过铁死亡途径影响非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型小鼠肝脏氧化损伤.方法:取16只ApoE?/?小鼠随机分为模型组和丹蒌片组,每组8只,另取8只C57BL/6J小鼠作为正常对照组.正常对照组饲喂普通饲料,其他组饲喂高脂饲料制备NAFLD模型.造模8周后丹蒌片组(680 mg·kg?1·d?1)灌胃给药4周,正常对照组与模型组给予等体积生理盐水灌胃4周.12周后全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C
目的:探讨建立人肝细胞系L-02脂肪性肝炎细胞模型的方法.方法:体外培养人正常肝细胞系L-02,分为对照组、脂肪变性组和模型组.对照组使用DMEM高糖培养液,脂肪变性组施加200μmol/L油酸(OA),而模型组则施加200μmol/L OA和50 mg/L低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)孵育36 h,观察不同处理对细胞活力、脂质沉积和炎症反应的影响.结果:0～100 mg/L LDL-C干预对细胞活力无显著影响.以50 mg/L LDL-C干预细胞0～48 h,36 h时细胞内总甘油三酯(TG)含量趋于
目的:研究钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaM-KII)和活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cells,NFAT)是否参与急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)中肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTEC)凋亡并探讨其机制.方法:阿霉素(adriamycin,ADR)干预人近端肾小管上皮细胞HK-2建立RT