NPM1基因表达对急性髓系白血病细胞系的影响及其机制探讨

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目的

探讨NPM1基因表达对急性髓系白血病(AML)细胞系的影响及其机制。

方法

选取AML细胞系U937和HL-60细胞,转染NPM1质粒至细胞系构建稳定克隆,采用Western blot法鉴定高表达NPM1蛋白的单克隆细胞。MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡率,显微镜下计数检测集落形成能力,Western blot法检测细胞周期相关信号通路蛋白表达,实时荧光定量PCR(RQ-PCR)法检测初诊AML患者骨髓单个核细胞NPM1基因表达水平。

结果

①U937和HL-60细胞中NPM1高表达组相对细胞增殖率与对照组相比,差异无统计学意义(4.68±1.28对3.89±0.81,3.34±0.37对2.68±0.29,P值均>0.05)。②U937和HL-60细胞中NPM1高表达组S期细胞比例均明显高于对照组[(50.22±3.42)%对(39.78±3.80)%,(59.01±3.27)%对(43.94±2.08)%,P值均<0.05]。③U937细胞NPM1高表达组和对照组相比具有更强的抗凋亡能力[(48.67±3.22)%和(68.77±10.21)%,P<0.05]和集落形成能力(772.7±24.0和652.3± 16.5,P<0.05),而HL-60细胞相应的两组细胞上述能力均相似。④NPM1高表达组细胞中CDK4、Cyclin D1、Cyclin D2及Cyclin E表达明显高于对照组,而Cyclin D3表达明显低于对照组。⑤细胞遗传学预后良好组AML患者NPM1定量水平低于预后中等组。

结论

NPM1蛋白能够促进更多的细胞进入S期,增强抗凋亡和细胞集落形成能力。NPM1定量水平可能预示细胞遗传学的危险度。

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