【摘 要】
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目的探讨阿司匹林和二甲双胍对甲状腺癌细胞TPC-1凋亡的影响和作用机制。方法采用CCK-8法和流式细胞术检测阿司匹林和二甲双胍对甲状腺癌TPC-1细胞增殖和凋亡的影响,采用Western blot检测阿司匹林、二甲双胍和3-MA对自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3)、p62和caspase-3表达水平的影响。结果CCK-8结果显示,0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L阿司匹林作用24
【机 构】
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郑州大学第一附属医院药学部 450052,郑州大学第一附属医院肝胆胰外科 河南省高等学校肝胆胰外科与消化器官移植重点学科开放实验室 450052,郑州大学第一附属医院药学部 450052,郑州大学第一
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目的探讨阿司匹林和二甲双胍对甲状腺癌细胞TPC-1凋亡的影响和作用机制。
方法采用CCK-8法和流式细胞术检测阿司匹林和二甲双胍对甲状腺癌TPC-1细胞增殖和凋亡的影响,采用Western blot检测阿司匹林、二甲双胍和3-MA对自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3)、p62和caspase-3表达水平的影响。
结果CCK-8结果显示,0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L阿司匹林作用24 h后,TPC-1细胞的存活率分别为(85.6±9.1)%、(79.9±8.6)%、(57.0±5.3)%和(55.7±5.4)%,半数抑制浓度(IC50)为4.297 mmol/L;0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L阿司匹林作用48 h后,TPC-1细胞的相对存活率分别为(76.7±2.8)%、(75.4±6.1)%、(46.1±4.1)%和(36.3±3.2)%,IC50为2.133 mmol/L。流式细胞术显示,1 mmol/L阿司匹林作用TPC-1细胞24 h后,TPC-1细胞的凋亡率为(29.2±8.5)%,与阴性对照组[(4.2±2.9)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示,阿司匹林处理后,与对照组比较,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值下降,而p62的表达水平升高;二甲双胍处理后,与对照组比较,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,而p62的表达水平下降。阿司匹林抑制细胞的自噬,而二甲双胍促进细胞的自噬。自噬抑制剂3-MA预处理TPC-1细胞后,二甲双胍组、3-MA组和二甲双胍联合3-MA组TPC-1细胞的相对存活率分别为(73.2±9.2)%、(95.8±3.3)%和(59.9±9.2)%,凋亡率分别为(35.5±1.5)%、(12.3±1.4)%和(49.9±5.4)%;与二甲双胍组比较,二甲双胍联合3-MA组TPC-1细胞的相对生长抑制率和凋亡率上升,差异均有统计学意义(均P<0.05)。二甲双胍联合阿司匹林处理后,二甲双胍组、阿司匹林组和二甲双胍联合阿司匹林组TPC-1细胞的相对存活率分别为(87.3±11.8)%、(85.7±9.6)%和(72.4±8.8)%,凋亡率分别为(29.7±4.0)%、(30.5±6.5)%和(52.5±4.6)%;与二甲双胍组和阿司匹林组比较,二甲双胍联合阿司匹林组TPC-1细胞的相对抑制率和凋亡率升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论二甲双胍活化的自噬降低其上调的生长抑制率和细胞凋亡水平,而阿司匹林可通过抑制细胞的自噬,协同二甲双胍促进甲状腺癌TPC-1细胞的凋亡。
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