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摘要 [目的] 从抗生素废水处理的活性污泥中筛选出具有高效降解能力的菌株。[方法]从抗生素制药工业废水处理的活性污泥中分离到1株抗生素高效降解菌NG3，对其进行形态学、生理生化鉴定和16SrDNA序列比对分析，同时对该菌株的生物学特性进行初步研究。[结果]从抗生素制药工业废水处理的活性污泥中分离得到1株抗生素高效降解菌NG3，经形态学、生理生化鉴定和16SrDNA序列比对分析，确定该菌株属于不动杆菌属（Acinetobacter sp.），命名为Acinetobacter sp.NG3。[结论] 为抗生素类工业废水高效处理提供借鉴。
关键词 抗生素； 16SrDNA ；Acinetobacter；降解菌
中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）31-10851-02
Screening and Its Degrading Properties of Effective Degradation Strains for Antibiotic Production Wastewater Treatment
WANG Junfeng1 ，YIN Yao2， CHEN Yuhua1 et al
（1.Heilongjiang Agricultural Engineering Vocational College， Harbin，Heilongjiang 150088； 2.Harbin Pharmaceutical Group biovaccine Co. Ltd， Harbin，Heilongjiang 150025 ）
Abstract [Objective] The aim was to screen effective degradation strains from activated sludge treatment of antibiotic wastewater. [Method] Through selective enrichment culture a effective degradation strains NG3 was isolated from antibiotic production wastewater treatment， physicbiochemical identification and phylogenetical analysis of 16S rDNA sequence were carried out.[Result] Through selective enrichment culture a effective degradation strains NG3 was isolated from antibiotic production wastewater treatment. Based on the results of physicbiochemical identification and phylogenetical analysis of 16S rDNA sequence，the strain was belonged to Acinetobacter，named as Acinetobacter sp.NG3.[Conclusion] The study provided reference for effective treatment of industrial waste for antibiotic.
Key words Antibiotics ；16S rDNA； Acinetobacter； Aiodegradation
近年來，随着抗生素制药工业的快速发展，抗生素工业废水已成为严重危害人类健康和生态环境平衡的棘手问题，对抗生素制药工业废水进行有效处理已经刻不容缓，成为制约社会可持续发展的紧要问题[1]。抗生素生产过程中产生大量的发酵液、酸废水、碱废水和有机溶剂废水等。其具有有机物浓度高、存在生物毒性物质、色度高、气味重、pH波动大等特征[2]。目前，抗生素制约工业废水处理方法主要有化学处理法、物化处理法（包括混凝-沉淀法、反渗透-膜分离法、吸附法、光降解法、包埋法及电解法等）、生物处理法以及多种方法复合处理等。其中生物处理方法具有处理条件较为温和、微生物适应性较强、费用低廉、较易培养等优点，现已广泛应用于抗生素制药工业废水的处理[3]。笔者试图从抗生素废水处理的活性污泥中筛选出具有高效降解能力的菌株，并研究其生物降解特性，应用于实际生产，以期为抗生素类工业废水高效处理提供借鉴。
1 材料与方法
1.1 水样 试验水样取自哈尔滨某制药企业废水排放口，活性污泥取自曝气池的回流污泥。
1.2 培养基
①无机盐培养基：KH2PO4 0.9 g/L，Na2HPO4·12H2O 6.5 g/L，MgSO4·7H2O 0.2 g/L，（NH4）2SO4 0.4 g/L，微量元素1 ml，121 ℃高压蒸汽灭菌20 min。②LB培养基：蛋白胨10.0 g/L，酵母膏5.0 g/L，NaCl 10.0 g/L，121 ℃高压蒸汽灭菌20 min，固体培养基中琼脂含量为1.5%。
1.3 试验方法
1.3.1 高效降解菌株的分离筛选。
（1）增殖培养：取2 ml活性污泥沉淀的上清液，接种到装液量200 ml的三角瓶中，于30 ℃、100 r/min下培养48 h，而后进行琼脂平板划线分离，分离得到的单菌落经多次反复分离、纯化后得到纯菌株[4]。
（2）菌株筛选：将分离纯化得到的菌落特征较典型、性状较优良的纯菌株分别接种到含50%废水的无机盐培养基中，于30 ℃、100 r/min条件下培养48 h，根据菌体的生长情况和对COD的去除率，筛选出降解率高的优势菌株[5-6]。
关键词 抗生素； 16SrDNA ；Acinetobacter；降解菌
中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）31-10851-02
Screening and Its Degrading Properties of Effective Degradation Strains for Antibiotic Production Wastewater Treatment
WANG Junfeng1 ，YIN Yao2， CHEN Yuhua1 et al
（1.Heilongjiang Agricultural Engineering Vocational College， Harbin，Heilongjiang 150088； 2.Harbin Pharmaceutical Group biovaccine Co. Ltd， Harbin，Heilongjiang 150025 ）
Abstract [Objective] The aim was to screen effective degradation strains from activated sludge treatment of antibiotic wastewater. [Method] Through selective enrichment culture a effective degradation strains NG3 was isolated from antibiotic production wastewater treatment， physicbiochemical identification and phylogenetical analysis of 16S rDNA sequence were carried out.[Result] Through selective enrichment culture a effective degradation strains NG3 was isolated from antibiotic production wastewater treatment. Based on the results of physicbiochemical identification and phylogenetical analysis of 16S rDNA sequence，the strain was belonged to Acinetobacter，named as Acinetobacter sp.NG3.[Conclusion] The study provided reference for effective treatment of industrial waste for antibiotic.
Key words Antibiotics ；16S rDNA； Acinetobacter； Aiodegradation
近年來，随着抗生素制药工业的快速发展，抗生素工业废水已成为严重危害人类健康和生态环境平衡的棘手问题，对抗生素制药工业废水进行有效处理已经刻不容缓，成为制约社会可持续发展的紧要问题[1]。抗生素生产过程中产生大量的发酵液、酸废水、碱废水和有机溶剂废水等。其具有有机物浓度高、存在生物毒性物质、色度高、气味重、pH波动大等特征[2]。目前，抗生素制约工业废水处理方法主要有化学处理法、物化处理法（包括混凝-沉淀法、反渗透-膜分离法、吸附法、光降解法、包埋法及电解法等）、生物处理法以及多种方法复合处理等。其中生物处理方法具有处理条件较为温和、微生物适应性较强、费用低廉、较易培养等优点，现已广泛应用于抗生素制药工业废水的处理[3]。笔者试图从抗生素废水处理的活性污泥中筛选出具有高效降解能力的菌株，并研究其生物降解特性，应用于实际生产，以期为抗生素类工业废水高效处理提供借鉴。
1 材料与方法
1.1 水样 试验水样取自哈尔滨某制药企业废水排放口，活性污泥取自曝气池的回流污泥。
1.2 培养基
①无机盐培养基：KH2PO4 0.9 g/L，Na2HPO4·12H2O 6.5 g/L，MgSO4·7H2O 0.2 g/L，（NH4）2SO4 0.4 g/L，微量元素1 ml，121 ℃高压蒸汽灭菌20 min。②LB培养基：蛋白胨10.0 g/L，酵母膏5.0 g/L，NaCl 10.0 g/L，121 ℃高压蒸汽灭菌20 min，固体培养基中琼脂含量为1.5%。
1.3 试验方法
1.3.1 高效降解菌株的分离筛选。
（1）增殖培养：取2 ml活性污泥沉淀的上清液，接种到装液量200 ml的三角瓶中，于30 ℃、100 r/min下培养48 h，而后进行琼脂平板划线分离，分离得到的单菌落经多次反复分离、纯化后得到纯菌株[4]。
（2）菌株筛选：将分离纯化得到的菌落特征较典型、性状较优良的纯菌株分别接种到含50%废水的无机盐培养基中，于30 ℃、100 r/min条件下培养48 h，根据菌体的生长情况和对COD的去除率，筛选出降解率高的优势菌株[5-6]。