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在进行基因工程的研究中,通常要将克隆的目的基因在一个特定的宿主系统中表达,并要求目的基因的表达水平较高.为此,首先必须选用一个具有高效表达潜力的表达载体.但由于现有商业载体的种类限制,载体中往往缺少可供使用的限制性内切酶位点.这种情况下,只能利用各种手段使载体和要连接的外源基因产生平末端,然后进行平末端连接.