应用Talen法制备apoE基因敲除大鼠模型

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目的应用转录激活因子样效应因子核酸酶(Talen)法制备载脂蛋白E(apoE)基因敲除大鼠模型,为进一步研究apoE基因功能,动脉粥样硬化(AS)疾病发病机制及治疗方法奠定基础。方法设计并合成针对大鼠apoE基因的Talen序列,应用原核显微注射方法制备子代鼠。通过PCR.测序及TA克隆-测序法检测仔鼠中apoE的突变,经传代及兄妹交配获得纯合型仔鼠,并对其基因型进行鉴定。应用Westemblot方法检测apoE-/-仔鼠各组织中ApoE蛋白表达水平;血清学分析血脂总胆固醇(CHO)及甘油三酯(TG)含量
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