【摘 要】
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目的探讨重复磁刺激(rMS)对体外培养大鼠神经干细胞(NSCs)分化和凋亡作用的影响。方法选取新生3 d内的SD大鼠乳鼠双侧海马组织悬浮培养NSCs。在分化培养基下，将NSCs单细胞悬液进行贴壁诱导分化后，分为空白对照组和rMS组。空白对照组为自然分化无特殊处理，rMS组刺激参数为频率10 Hz、50%最大输出强度、每日1000个脉冲、共刺激7 d。rMS组最后1次干预后1 h内收集2组细胞进行免
【机 构】
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目的探讨重复磁刺激(rMS)对体外培养大鼠神经干细胞(NSCs)分化和凋亡作用的影响。
方法选取新生3 d内的SD大鼠乳鼠双侧海马组织悬浮培养NSCs。在分化培养基下，将NSCs单细胞悬液进行贴壁诱导分化后，分为空白对照组和rMS组。空白对照组为自然分化无特殊处理，rMS组刺激参数为频率10 Hz、50%最大输出强度、每日1000个脉冲、共刺激7 d。rMS组最后1次干预后1 h内收集2组细胞进行免疫荧光染色分析分化神经元的比例，采用免疫印迹法(Western blotting)检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、β-微管蛋白3(β-Ⅲtubulin)以及脑源性神经营养因子(BDNF)的表达量。再将分化7 d、无rMS干预的NSCs诱导凋亡，分为诱导凋亡组和诱导凋亡rMS组。诱导凋亡rMS组在诱导凋亡1 h后进行rMS干预，刺激参数同上，诱导4 h后收集细胞，通过流式细胞仪检测早期和晚期凋亡率，采用Western blotting检测凋亡相关蛋白(Caspase-3，Bcl-2，Bax)的表达量。
结果rMS干预7 d后NSCs分化为神经元的比例无显著性变化(P>0.05)，β-Ⅲtubulin、GFAP、BDNF相对表达量无显著性变化(P>0.05)。诱导凋亡rMS组的细胞凋亡率(9.14±4.72)%与诱导凋亡组的细胞凋亡率(15.38±4.55)%比较，差异有统计学意义(P<0.05)。诱导凋亡rMS组的Caspase-3、Bcl-2、Bax相对蛋白表达量与诱导凋亡组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论频率10 Hz、干预7 d的rMS对体外培养大鼠NSCs的分化无显著影响，但能减少诱导凋亡剂下神经细胞的凋亡，对神经细胞具有保护作用。
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