HPV病毒E1蛋白多克隆抗体制备及在宫颈上皮病变检测的运用

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目的:研制人乳头瘤病毒(HPV)E1蛋白抗体,并运用于组织病理学免疫组织化学检测。方法:通过基因重组、原核表达并纯化HPV E1蛋白片段;经免疫兔制备多克隆抗体,并经免疫印迹及基因转染鉴定特异性;免疫组织化学法检测13例宫颈病变中E1蛋白,经原住杂交验证。结果:将PCR扩增的E1蛋白保守功能域(第362—456aa)基因片断重组于原核表达载体pEK-318的6×His标签下游,经诱导表达和亲合层析,纯化出14kD His—E1蛋白。制备的多克隆血清经免疫印迹法检测显示不仅可与His—E1蛋白结合
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