疏花蔷薇果总多酚抗氧化活性

来源 :安徽农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heimacom
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  摘要[目的]研究疏花蔷薇果中总多酚的抗氧化能力,为进一步开发疏花蔷薇果提供试验数据。[方法]利用已优化的响应曲面法提取疏花蔷薇果中的总多酚,并测定其含量;应用3种抗氧化模型(清除DPPH自由基、清除羟基自由基、清除超氧阴离子自由基),建立疏花蔷薇果中的多酚类成分抗氧化能力模型,以抗坏血酸为阳性对照,评价疏花蔷薇果中总多酚的体外抗氧化能力。[结果]在试验浓度范围内,疏花蔷薇果总多酚对羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基均有较强的清除能力,其清除率与总多酚浓度有一定的量效关系。[结论]疏花蔷薇果总多酚有明显的清除自由基能力,可以作为一种有效的天然抗氧化剂来开发利用。
  关键词疏花蔷薇果;总多酚;抗氧化活性
  中图分类号S567文献标识码
  A文章编号0517-6611(2016)01-162-03
  Abstract[Objective]To study antioxidant activity of total polyphenols from Rosa laxa Ratz.fruits,to provide experimental data for the further development of Rosa laxa Ratz.fruits.[Method] Total polyphenols from Rosa laxa Ratz.fruits was extracted by optimized response surface methodology,and its content was determined.Utilizing the three types of antioxidant activity models(the active effect of clearing DPPH radical,hydroxyl radical and superoxide anion radical),the antioxidant activity models of polyphenols ingredient from Rosa laxa Ratz.fruits were established,with ascorbic acid as a positive control,the antioxidant activity ability in vitro of total polyphenol from Rosa laxa Ratz.fruits was evaluated.[Result]With a certain range of concentrations,total polyphenols from Rosa laxa Ratz.fruits showed strong scavenging capacities on the DPPH radical,hydroxyl radical and superoxide anion radical.And the effect was enhanced with an increase in the concentration,and the scavenging rate was certain dosedependent manner.[Conclusion]Total polyphenols from Rosa laxa Ratz.fruits has significant capacity of scavenging free radical,it can be applied as an effective natural antioxidant.
  Key wordsRosa laxa Ratz.fruits; Total polyphenols; Antioxidant activity
  疏花蔷薇果为蔷薇科(Rosaceae)植物疏花蔷薇(Rosa laxa Ratz.)的干燥果实。多产于我国海拔500~1 150 m的灌木丛中或河谷旁,其中以新疆阿尔泰山区、额敏河谷平原、准噶尔山区以及南疆沿天山一带分布较多[1],主要含有内酯、香豆素、糖和苷类、黄酮类、有机酸和酚类鞣质类等化学成分[2-3]。疏花蔷薇果在维吾尔族民间多有使用,是一种维吾尔传統药材,收录于1999年版的《中华人民共和国卫生部药品标准》(维吾尔药分册)。研究表明,疏花蔷薇的经济药用价值较高,其叶子外用可治肿毒,根能活血化瘀,花能清暑热解渴止血,特别是果实含有多种营养成分[4]。
  多酚类化合物的生理活性与其较强的清除自由基和抗氧化性密切相关。随着近20年来抗氧化剂的蓬勃发展,目前已从单纯的合成抗氧化剂和食品抗氧化剂逐渐发展成为天然抗氧化剂与体内自由基清除剂,从天然植物中寻找体内自由基消除剂也将是现代医药和保健行业的发展趋势。疏花蔷薇果中多酚类化合物研究尚未报道,笔者利用前期已优化的超声波提取工艺对其多酚类物质抗氧化能力进行了研究,以期为药用植物资源的综合开发利用提供科学依据。
  1材料与方法
  1.1试药
  疏花蔷薇果(Rosa laxa Ratz.Fruits)药材购于乌鲁木齐市二道桥维药材市场,经新疆医科大学中医学院乌莉娅·沙衣提教授鉴定为疏花蔷薇(Rosa laxa Ratz.)的干燥果实。其余试剂均为分析纯,水为蒸馏水。
  1.2仪器KQ3200DE数控超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司),752紫外可见分光光度计(上海菁华科技仪器有限公司)。
  1.3试验方法
  1.3.1没食子酸标准曲线的制备。
  精密称定没食子酸对照品25 mg,置于250 mL量瓶中,加水配成0.1 mg/mL的对照品溶液。精密量取没食子酸对照品溶液0、2、3、4、5、6 mL,分别置于10 mL棕色容量瓶中,各加入Folin-Ciocalteu试剂05 mL,在1~8 min内加入20% Na2CO3溶液1.5 mL,摇匀,加水稀释定容至刻度,摇匀,75 ℃水浴15 min,快速冷却,在400~800 nm波长下扫描最大吸收波长。   1.3.2供试品溶液的制备及多酚含量测定。
  疏花蔷薇果粉碎,过2号筛,精密称取约6 g,分别用等量的石油醚超声萃取2次,过滤,弃去石油醚。利用响应曲面法已优化的超声波提取工艺(45%乙醇、料液比1∶18、超声时间50 min)提取,超声提取后4 000 r/min离心5 min,取上清液,定容至100 mL,即得供试品溶液。精密量取供试品溶液1 mL,用45%乙醇定容于1 000 mL量瓶中,按照“1.3.1”方法制备溶液,在紫外分光光度计下测定吸光度,计算疏花蔷薇果中总多酚的含量。
  1.3.3DPPH自由基清除能力测定。
  精密称取2 mg DPPH,用无水乙醇定容至25 mL (有效期1 d),配制成2×10-4mol/L的溶液,避光。将供试品溶液用45%乙醇制成生药浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、10、1.2 mg/mL的溶液,待测。取3支试管,编号为A、B、C,A中加入2×10-4mol/L的DPPH乙醇溶液 2 mL,再加入2 mL的生药浓度分别为0.2、0.4、0.6、08、1.0、1.2 mg/mL的药液,摇匀,在黑暗室温下反应30 min,于波长517 nm处测得吸光度值,记作Ai;B中加入2×10-4mol/L的DPPH乙醇溶液2 mL、无水乙醇2 mL,摇匀后测得吸光度值A0;C中加入2 mL药液(不同浓度)、2 mL无水乙醇,摇匀,测得吸光度值Aj;以抗坏血酸(VC)为阳性药物对照[5]。按下式计算抗氧化剂对DPPH自由基的清除率:DPPH自由基清除率=[1-(Ai-Aj)/A0]×100%。
  1.3.4羟基自由基清除能力测定。供试品溶液配制成1、2、3、4、5、6 mg/mL 的6个浓度,取18支试管,每个浓度设3个平行管,每管中加入9 mmol/L的FeSO4溶液1 mL、9 mmol/L的水杨酸-乙醇溶液1 mL,再加入各浓度下的供试品溶液2 mL,最后加入0.5 mL 8.8 mmol/L的H2O2启动反应,37 ℃水浴中反应30 min,以蒸馏水调仪器零点,在510 nm处测量各浓度下的吸光度,通过公式计算其清除率。以蒸馏水代替样品溶液,为空白对照液的吸光度,记为A0;加入药物溶液后的吸光度,记为Ai;以蒸馏水代替H2O2,样品溶液本底的吸光度,记为Aj,以VC为阳性药物对照[6-8]。清除率=[A0-(Ai-Aj) ] /A0×100%。
  1.3.5超氧阴离子自由基消除能力测定。
  采用邻苯三酚自氧化法产生O2-,试验分别设置对照管和加药管,对照组管设3个平行管,分别加入50 mmol/L的TrisHCl缓冲溶液(pH 8.2,含2 mmol/L的EDTA) 3 mL,加入1 mL蒸馏水,混匀后25 ℃水浴保温20 min,取出后立即加入25 ℃水浴中预热的2.5 mmol/L邻苯三酚1 mL (以10 mmol/L HCl代替邻苯三酚作为空白),混匀后立即倒入比色杯,于320 nm处每隔30 s测吸光度值(A)9次,共测4 min,
  计算对照管溶液吸光度随时间的变化率(ΔA)。加药组(2、4、6、8、10、12 mg/mL)每个浓度设3个平行管,在加入邻苯三酚前先加入1 mL不同浓度梯度的药液和50 mmol/L的TrisHCl缓冲溶液3 mL,混匀后25 ℃水浴保温20 min,取出后立即加入在25 ℃水浴中预热的2.5 mmol/L邻苯三酚1 mL,混匀后立即倒入比色杯,于320 nm处每隔30 s测A0值,共9次,测4 min,计算药液吸
  光度随时间的变化率(ΔA0)。空白管以10 mmol/L的盐酸代替邻苯三酚,其余按照样品管加样,不同浓度药液测试时分
  别以其对应的空白管调仪器零点。以抗坏血酸为
  阳性药物对照。超氧阴离子自由基O2-清除率=(ΔA-ΔA0)/ΔA×100%,
  式中,ΔA为表示对照管邻苯三酚自氧化变化速率,ΔA0为表示加药管邻苯三酚自氧化变化速率。
  2结果与分析
  2.1没食子酸标准曲线的制备及总多酚含量测定结果波长扫描结果表明,没食子酸在760 nm处有强吸收峰,故选择760 nm为测定波长。以吸光度为纵坐标、没食子酸浓度为横坐标,绘制标准曲线,回归方程为y=1 374.0x-0.002 2(R=0.999 7),表明没食子酸在0.02~0.06 mg/mL与吸光度呈良好的线性关系。按“1.3.2”方法制备供试品溶液,测定吸光度,计算得出疏花蔷薇果中总多酚的含量为0.69%。
  2.2疏花蔷薇果总多酚对DPPH自由基的清除作用
  由图1可见,疏花蔷薇果总多酚在试验浓度(0.2~1.2 mg/mL)范围内,对DPPH自由基有较强的清除能力,且清除效果与多酚浓度之间具有明显的量效关系,IC50约为0.45 mg/mL,抗坏血酸(VC)的IC50约为0.25 mg/mL,表明其清除能力弱于VC。
  2.3疏花蔷薇果总多酚对·OH自由基的清除作用
  从图2可看出,疏花蔷薇果总多酚在1 mg/mL时,其清除率仅为21.11 %。但当疏花蔷薇果总多酚浓度升高后,清除羟自由基的能力也开始增强,表明其清除能力与疏花蔷薇果总多酚浓度间有一定的量效关系。随着浓度的增加,其对·OH的清除作用逐渐增强,在6 mg/mL濃度时,对·OH的清除率可达99.39%,IC50约为3 mg/mL,VC的IC50约为0.5 mg/mL,表明其清除能力弱于VC。
  2.4疏花蔷薇果总多酚对超氧阴离子自由基的清除作用
  图3显示,疏花蔷薇果多酚对超氧阴离子自由基具有较强的清除能力,且清除率随多酚浓度的增加而增大,表明其清除能力与疏花蔷薇果总多酚的浓度间有一定的量效关系。当总多酚浓度为12 mg/mL时,超氧阴离子自由基清除率为96.07%,IC50约为3 mg/mL,VC的IC50约为0.4 mg/mL,表明其清除能力弱于VC。   3结论与讨论
  利用已优化的响应曲面法提取疏花蔷薇果中的总多酚,并应用3种抗氧化模型,以抗坏血酸为阳性对照,研究疏花蔷薇果中总多酚的体外抗氧化能力,结果发现,疏花蔷薇果总多酚提取物对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基均具有明顯的清除能力,表明疏花蔷薇果总多酚具有较强的自由基清除能力以及较强的抗氧化活性,且在各个体系中,疏花蔷薇果多酚的抗氧化活性和其浓度间均有良好的量效关系。多酚类的抗氧化能力已被公认,且在某些药用植物中抗氧化能力和其所含的多酚类含量呈正比[9-12] 。由试验数据可知疏花蔷薇果总多酚对自由基的清除能力不及抗坏血酸,可能是由于多酚提取物纯度较低,限制了其清除能力的发挥。
  我国是蔷薇属植物的主要原产地之一,疏花蔷薇广泛分布于新疆各地区,资源丰富,可以成为天然抗氧化活性物质的提取素材,是抗氧化剂的丰富来源。分离提取疏花蔷薇果中的抗氧化活性成分,作为药品、保健食品及天然食品抗氧化剂来开发,具有广阔的前景。
  参考文献
  [1]
  中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准:维吾尔药分册[S].乌鲁木齐:新疆科技出版社,1999:10.
  [2] 孙兰萍,张斌,赵大庆,等.石榴皮中多酚的提取工艺优化[J].包装与食品机械,2007,25(4):20-23.
  [3] 田莉,史红,田树革,等.维药疏花蔷薇果的体外抑菌作用研究[J].安徽农业科学, 2012,40(12):7038-7039.
  [4] 李庆典,李颖,张彦海.疏花蔷薇果实营养成分分析[J].营养学报,1993,15(3):361-362.
  [5] 赵国建,李桂峰,董周永,等.石榴籽中多酚的提取及其抗氧化作用研究[J].西北植物学报,2008,28(12):2532-2537.
  [6] 陈留勇,孟宪军,贾薇,等.黄阿冰溶性多糖的抗肿瘤作用及清除自由基提高免疫活性研[J].食品科学,2004,25(2):167-170.
  [7] SMIRONFF N,CUMBES O J.Hydroxyl radical scavenging activity of compatible solutes [J].Phytochemistry,1989,28(4):1057-1060.
  [8] 马晓华,连宾.几种常见食用菌清除羟基自由基能力的研究[J].食品与发酵工业,2005,31(10):25-29.
  [9] 郭丽萍,卢家炯,仇宏伟.香蕉皮多酚清除自由基作用的初步研究[J].食品科技,2007(6):131-134.
  [10] 陈欣欣,许时婴.黑莓渣提取物中多酚类化合物抗氧化活性的研究[J].食品工业,2007(3):3-6.
  [11] 张赁彬,龚钢明,戴妙妙.甘薯多酚粗提液的抗氧化活性研究[J].中国粮油学报,2007,22(5):76-80.
  [12] 顾宇翔,范立强,袁勤生.虫草及其发酵制品抗氧化能力研究[J].中国中药杂志,2007,32(11):1028-1031.
其他文献
摘要[目的] 探讨不同饲料对黄粉虫成虫产卵量的影响。[方法] 用全麸皮(对照组)、85%麸皮+15%黄豆粉(试验Ⅰ组)、98%麸皮+2%蜂蜜(试验Ⅱ组)饲喂黄粉虫成虫,研究不同饲料对黄粉虫成虫产卵量的影响。[结果] 试验Ⅰ组黄粉虫成虫从羽化到产卵历时最短,仅需6 d。试验Ⅰ组产卵数最高,日均产卵数为6.59粒/只,试验Ⅱ组产卵数次之,而对照组日均产卵数最低,仅为3.02粒。试验Ⅱ组成虫死亡率最高,
期刊
摘要钵育机摆栽技术作为一种新型的机插栽培技术,近年在安徽水稻主产区示范推广,2015年在无为、白湖两地百亩以上超高产攻关示范上双双亩产超吨粮。总结了无为、白湖两地超高产方栽培关键环节的技术参数、指标,归纳出钵育机插平衡超高产栽培的品种选用技术原则,钵育机摆栽的育秧、机插和肥水管理以及病虫草害防治等关键技术措施,以规范钵育机插平衡栽培绿色超高产技术,加速钵苗机插技术的推广。  关键词钵苗机插;平衡栽
期刊
摘要 [目的] 为刺参的繁殖以及工厂化人工育苗提供理论基础。[方法] 以渤海湾地区刺参为试验材料, 研究渤海湾地区刺参生殖腺发育生物学零度及其性成熟的有效积温。[结果] 渤海湾地区刺参生殖腺发育的生物学零度为6.14 ℃,而有效积温为800.19 ℃·d。[结论] 该研究在渤海湾地区刺参育苗生产中具有重要的参考价值。  关键词刺参;生殖腺;有效积温;生物学零度  中图分类号S968.9文献标识码 
期刊
摘要近年来研究表明,真菌线粒体基因组大小存在明显变化,范围在10 kb到100多kb之间。这种变化引起了真菌学家、遗传学家及进化生物学家的浓厚兴趣。该研究综述了影响真菌物种内及物种间线粒体基因组大小变化的一些因素,包括内含子、线粒体质粒和其他可移动遗传因子。了解和认识真菌线粒体基因组的遗传变化,可以更好地帮助理解真菌乃至其他真核生物的进化。  关键词线粒体;基因组尺寸;内含子;线粒体质粒;可移动因
期刊
摘要[目的]探求甘薯中类胡萝卜素的最佳提取工艺,以实现甘薯的综合利用。[方法] 采用紫外可见分光光度计测定不同溶剂、料液比、浸提时间、浸提温度条件下提取所得类胡萝卜素溶液的吸光值,并以此作为指标来考察甘薯中类胡萝卜素提取的最佳工艺。[结果] 试验得出,甘薯中类胡萝卜素的最佳提取溶剂为乙酸乙酯、最佳料液比为1∶25 g/mL 、最佳浸提时间为50 min、最佳温度为50 ℃,此条件下类胡萝卜素的取得
期刊
摘要 [目的] 研究不同中草藥对凡纳滨对虾生长和抗病的影响,为对虾的健康养殖提供科学依据。[方法] 将黄芪、板蓝根、柴胡、甘草和茯苓经超微粉碎后,分别添加1.5%到基础饲料中,饲喂凡纳滨对虾35 d, 研究其对凡纳滨对虾的生长、成活率、饲料系数、消化酶活力、非特性免疫指标及感染WSSV后的抗病力的影响。[结果] 各组凡纳滨对虾的增重率和特定生长率大小顺序均为茯苓组>黄芪组>甘草组>柴胡组>板蓝根组
期刊
摘要[目的]明确国内主要出口中药材二氧化硫残留现状,为相关单位制订许可标准提供资料。[方法]采用国家标准GB/T5009.34-2003的蒸馏法测定二氧化硫含量。[结果]此次检测中,测试样品均有不同程度的二氧化硫残留。采自亳州市场的白芍二氧化硫含量为632.69 mg/kg,远远超过残留限量;产自福建和浙江的石菖蒲中二氧化硫的含量均大于100 mg/kg的限量,其他中药材也普遍存在超标现象。[结论
期刊
摘要[目的]了解安徽省蔬菜基地土壤和灌溉水中邻苯二甲酸酯(PAEs)的残留状况,为农产品的质量安全监管提供科学依据。[方法]对合肥、滁州和马鞍山地区12个代表性蔬菜基地的土壤和灌溉水进行调查采样,利用气相色谱质谱联用检测技术(GCMS),分析了土壤和灌溉水中18种PAEs化合物的含量。[结果]土壤样品中检出了邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二(2乙基)己酯(DEHP),其总含量为0.204
期刊
摘要[目的] 研究水龟虫多糖的提取条件。[方法] 分别采用3种方法对水龟虫多糖进行了提取,采用苯酚-硫酸法进行多糖含量测定,对比不同提取方法中多糖的含量差异。[结果] 热水浸提、碱提法和酶解法3种方法对水龟虫多糖提取所得多糖的含量分别为153%、2.61%、2.66%。[结论] 通过试验确定了酶解法为水龟虫多糖的提取最佳方法。  关键词水龟虫多糖;提取方法;含量测定;条件因素  中图分类号S186
期刊
摘要[目的] 为黑果花楸相关加工产品提供理论和含量依据。[方法]以黑果花楸、蓝莓和蓝靛果为材料,采用紫外-分光光度法测定3种小浆果多糖及总黄酮含量,pH示差法测定花色苷含量,并进行比较分析。[结果]黑果花楸全果的花色苷、总黄酮、多糖含量均高于蓝莓和蓝靛果,在所测3种小浆果中最高,分别为0.352 0、2.636、1.764 mg/g。[结论]黑果花楸中花色苷、总黄酮、多糖含量较高,具有很高的营养价
期刊