【摘 要】
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目的 探讨白纹伊蚊唾液特异性34k2重组蛋白(rAlb-34k2)刺激(小鼠腹腔巨噬细胞)RAW264.7及C57BL/6小鼠后补体相关成分mRNA的变化. 方法 分别用不同浓度rAlb-34k2蛋白刺激RAW26
【机 构】
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贵州医科大学基础医学院免疫学教研室,贵州贵阳550025;贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室;贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室;贵州医科大学微生物与生化药学工程中心
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目的 探讨白纹伊蚊唾液特异性34k2重组蛋白(rAlb-34k2)刺激(小鼠腹腔巨噬细胞)RAW264.7及C57BL/6小鼠后补体相关成分mRNA的变化. 方法 分别用不同浓度rAlb-34k2蛋白刺激RAW264.7细胞和C57BL/6小鼠足垫,采集样本,Trizol提取RNA,逆转录为cDNA后经实时荧光定量PCR方法检测刺激后不同时间各组标本中补体C3、C1q、CfB、CRIg的mRNA变化. 结果 rAlb-34k2诱导CfB、C3、C1q的mRNA表达上调,且皮肤组织上调幅度高于RAW264.7细胞,其中以CfB mRNA的上调幅度及持续更为显著,在诱导24 h时各组(5μg、20 μg)2-△△CT值分别是23.90±8.38、8.50±1.64(P＜0.05);但刺激12-24 h时高剂量组与低剂量组比较上调幅度差异无统计学意义(P＞0.05).在RAW264.7细胞,以刺激6h各种补体固有分成CfB、C3、C1q表达上调,但随时间延长均恢复至正常水平,各剂量组间差异不明显.在局部皮肤组织,rAlb-34k2刺激24 h后CRIg表达上调,且呈浓度和时间依赖趋势;48 h时,各组rAlb-34k2(5 μg、20 μg)2-△△CT值达到高峰,分别为8.67±2.44和32.98±9.74,有统计学差异(P＜0.05).在Raw264.7细胞,刺激6h时CRIg有上调表达趋势,但随时间延长而下调,各剂量组间比较差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 白纹伊蚊唾液rAlb-34k2蛋白参与调控巨噬细胞及皮肤补体重要成分的表达变化,在组织中尤为显著,且显著上调定居组织的巨噬细胞特异性膜受体CRIg.
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