【摘 要】
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目的 运用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分析肾母细胞瘤细胞株G401细胞培养液与正常胚肾细胞株CCC-HKE-1细胞培养液的差异蛋白质,分析G401利用血清中
【机 构】
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河南省郑州大学第一附属医院小儿外科河南省郑州大学肿瘤分子外科研究所,浙江大学第二附属医院肿瘤研究所
【基金项目】
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河南省卫生厅科技攻关计划项目;国家自然科学基金
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目的 运用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分析肾母细胞瘤细胞株G401细胞培养液与正常胚肾细胞株CCC-HKE-1细胞培养液的差异蛋白质,分析G401利用血清中的蛋白质,并比较G401培养液与患儿血清存在的相似蛋白质.方法 培养含10%胎牛血清及无血清的G401细胞和含10%胎牛血清的胚肾细胞株CCC-HEK-1细胞,收集以上三种培养液及G401裂解液,收集肾母细胞瘤患儿术前血清.将以上样本应用于WCX2(弱阳离子交换)芯片,用SELDI-TOF-MS技术检测、阅读和分析各组间差异及相似蛋白质.结果 G401和CCC-HEK-1培养液间存在显著的蛋白质差异表达;G401分泌的蛋白质质荷比有:3996、4084、4144、4215、4232、5980、6069、6094、6855、8553Da;G401利用血清中的蛋白质质荷比有:3830、3917、4144、4460、4795、4932、5688、5981、6023、6050、6075、6094、6188、6203、6857、7064、7308、7964 Da;质荷比为4082、4143Da的蛋白质在肿瘤细胞培养液和患儿血清中都检测到.结论 SELDI-TOF-MS技术应用于体外培养的肾母细胞瘤细胞和患儿血清方法简便、敏感性高、重复性好;从而为从蛋白质水平研究肾母细胞瘤的发病机制和治疗靶位的寻找奠定基础.
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