论文部分内容阅读
目的：
减少鼠源性单抗的免疫原性，获得最接近于天然构型的高表达基因工程抗体。
方法：将抗人纤维蛋白单抗SZ-63的轻链可变区基因VK和重链可变区基因VH分别与人IgG恒区基因CK、CH进行拼接、扩增，构建了真核表达载体α-lys17-63VK/Hu和α-lys30-63VH/Hu，并应用lipofectin方法将其相继导入小鼠骨髓瘤细胞SP2/0中，通过加压筛选获得一抗性细胞克隆，经体外长期传代培养和三次克隆化得到一稳定表达的阳性细胞株。
结果：培养上清液中的抗体蛋白表达量为1mg/L，腹水中为40mg/L经Western blot和竞争实验证实表达的嵌合抗体具有与亲本鼠源单抗相一致的纤维蛋白结合特性。
结论：SZ-63嵌合抗体可用于血栓性疾病的导向显像和治疗。