【摘 要】
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目的研究阴道毛滴虫粘附蛋白AP33的基因结构特点并构建其表达载体.方法提取阴道毛滴虫mRNA,逆转录合成cDNA,PCR得到阳性克隆,将其亚克隆到pUCm-T载体中进行PCR、酶切及测序分
【机 构】
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浙江温州医学院寄生虫学教研室,温州,325003
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目的研究阴道毛滴虫粘附蛋白AP33的基因结构特点并构建其表达载体.方法提取阴道毛滴虫mRNA,逆转录合成cDNA,PCR得到阳性克隆,将其亚克隆到pUCm-T载体中进行PCR、酶切及测序分析,并与GenBank中核苷酸序列进行同源性分析.再将亚克隆与表达载体分别酶切并连接.结果阳性克隆经酶切鉴定,目的基因片段长度为927bp.ap33与国外已报道的3株T.vaginalis的ap33基因分别具99%、97%、94%的同源性.结论成功克隆出阴道毛滴虫ap33基因序列,与已公布的ap33序列有很高的同源性.构建获得PET-32a(+)-ap33重组质粒,可在原核中进一步表达特异性蛋白.
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