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目的
使用膜片钳全细胞记录方式,观察腺苷对氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠海马锥体神经元癫痫样放电的影响。
方法选20只200 g左右的成年SD大鼠,雌雄不拘,使用氯化锂-匹罗卡品制备大鼠癫痫模型,造模成功24 h后,使用10%水合氯醛腹腔注射麻醉,断头取海马,再修块切片,厚度约350 μm,移入37 ℃预热的人工脑脊液中孵育1 h后,转入23 ℃水浴中孵育30 min备用。全细胞膜片钳记录海马脑片CA1区锥体神经元的动作电位及诱发的兴奋性突触后电流,并观察25 μmol/L腺苷对上述指标的干预情况。
结果通过电流钳模式记录发现,腺苷对海马CA1区神经元的动作电位频率有明显的抑制作用;通过电压钳模式记录发现,癫痫大鼠[(1.44±0.06)nA]海马神经元诱发的兴奋性突触后电流幅值较正常大鼠[(0.50±0.06)nA]的明显升高(独立样本t检验,t=30.99,P<0.01);25 μmol/L腺苷对海马CA1区神经元诱发的兴奋性突触后电流的幅值抑制明显[(0.66±0.06)nA],加入腺苷A1受体抑制剂DPCPX(10 μmol/L)又可以使幅值回升[(0.92±0.06)nA](单因素方差分析及q检验,F=266.3,q=9.81,P<0.01)。
结论腺苷抑制氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠海马锥体神经元癫痫样放电,是通过对突触后兴奋性的干预完成的。