【摘 要】
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目的对癫痫模型海马神经细胞凋亡中caspase-3的作用机制进行实验研究。方法以TUNEL法检测KA致痫大鼠海马神经细胞凋亡情况,以Western blot法检测其中eIF2α的表达变化。取模
【机 构】
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第二军医大学长海医院神经外科; 复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室; 复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室 200433上海; 200433上海;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(39980039);上海市自然科学基金(99ZB14039)
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目的对癫痫模型海马神经细胞凋亡中caspase-3的作用机制进行实验研究。方法以TUNEL法检测KA致痫大鼠海马神经细胞凋亡情况,以Western blot法检测其中eIF2α的表达变化。取模型鼠海马组织构建cDNA文库,构建caspase-3的酵母三杂交诱饵载体,进行筛库实验。结果在癫痫发作后12 h TUNEL阳性神经元增加,72 h达高峰;发作后24 h出现eIF2α被caspase-3酶切的片段,逐渐增加至72 h。制作成功cDNA文库,构建了caspase-3的酵母三杂交诱饵载体,筛库获得caspase-3的新底物Miz1。结论在癫痫大鼠海马神经细胞凋亡中eIF2α被caspase-3酶切。酵母三杂交寻找caspase-3下游底物有可行性,从癫痫大鼠海马中获得caspase-3的底物Miz1。
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