猪IFN-γ mRNA TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

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为建立一种检测猪γ-干扰素(IFN-γ)的荧光定量RT—PCR方法,针对猪IFN-γ基因和管家基因cyclophilin A(CyPA)的核苷酸序列分别设计了特异性引物和TaqMan荧光探针,以重组质粒pMD18-T-IFN-γ和pMD18T-CyPA为标准品,进行实时荧光定量RT-PCR检测,并构建猪IFN-γ mRNA和CyPA的荧光定量RT—PCR标准曲线。结果表明,建立的方法在1×10^1~1×10^7copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,相关系数产均高达0.999,
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