原发性肝癌组织中Kruppel样因子6基因的变异及其抗细胞增殖功能的改变

来源 :中华肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bear1634
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目的 初步探讨基因突变对Kruppel样因子6(KLF6)抗肝癌细胞增殖功能的影响及机制.方法以聚合酶链反应(PCR)扩增原发性肝癌及其癌旁组织KLF6基因外显子2序列,对扩增的PCR产物进行双向序列测定.构建野生型及突变型KLF6真核表达质粒并分别转染人肝癌细胞株HepG2,流式细胞仪及四甲基偶氮唑盐试验观察KLF6基因对细胞周期及细胞增殖活性的影响.以western blot技术检测外源KLF6基因对HepG2细胞p21WAF1表达的影响.结果23例原发性肝癌组织中2例(8.7%)出现KLF6基因突变,其中1例导致氨基酸改变(W162G).转染野生型KLF6的HepG2细胞G0~G1期所占细胞的比例明显增高,而转染突变型KLF6实验组G0~G1期细胞无显著增加.转染野生型KLF6对HepG2细胞生长的抑制率显著高于突变型KLF6实验组和空载体实验对照组.外源野生型KLF6基因能上调肝癌细胞p21WAF1表达,而突变型KLF6基因上调p21WAF1表达的能力较低.结论 KLF6基因突变可能在原发性肝癌发病机制中起到一定作用,但基因突变可能不是KLF6基因失活的主要原因.上调p21WAF1表达是KLF6基因抑制肝癌细胞增殖的重要途径。

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