黄瓜花叶病毒cDNA载体在烟草细胞中表达外源基因

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：l13633332021

【摘要】

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为了探讨利用黄瓜花叶病毒(CMV)构建表达载体的可行性,分离了山东株(SD)CMVRNA3的全长cDNA.测定其全序列后,采用定点突变的方法在衣壳蛋白(CP)基因起始密码子处改造出一个Nsi

【作者】

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雷万里方荣祥张国华

【机构】

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中国科学院微生物研究所植物生物技术开放实验室

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

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2001年1期

【关键词】

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黄瓜花叶病毒置换型载体烟草原生质体表达 Cucumber mosaic virus %replacement vector tobacco pr

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划(863计划)

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为了探讨利用黄瓜花叶病毒(CMV)构建表达载体的可行性,分离了山东株(SD)CMVRNA3的全长cDNA.测定其全序列后,采用定点突变的方法在衣壳蛋白(CP)基因起始密码子处改造出一个NsiⅠ位点,可将外源基因引入NsiⅠ位点和CP基因终止密码子上游附近的XhoⅠ或SalⅠ位点而置换掉CP基因.分别用绿色荧光蛋白(GFP)基因、β-葡糖醛酸酶(GUS)基因以及小鼠二氢叶酸还原酶(DHFR)基因3种报告基因置换CP基因.将Fny株CMVRNA1、RNA2和SD-CMV嵌合RNA3的cDNA分别插入pCaSS

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