【摘 要】
：
目的 评价轮状病毒(Rotaviruses,RVs)疫苗株Rotarix和RotaTeq VP8*蛋白与组织血型抗原(histo-blood group antigens,HBGAs)基因融合的免疫效果. 方法 从GenBank获取Rotarix和
【机 构】
：
湖南省人民医院/湖南师范大学附属第一医院检验科,湖南长沙,410005;湖南省妇幼保健院检验科;湖南省人民医院胃肠、小儿外科
论文部分内容阅读
目的 评价轮状病毒(Rotaviruses,RVs)疫苗株Rotarix和RotaTeq VP8*蛋白与组织血型抗原(histo-blood group antigens,HBGAs)基因融合的免疫效果. 方法 从GenBank获取Rotarix和RotaTeq两种疫苗VP8*蛋白基因序列,根据大肠埃希菌常用密码子进行序列优化后人工合成Rotarix和RotaTeqVP8*蛋白基因并采用PCR扩增合成的两种基因,引物上、下游分别引入Nde Ⅰ和Xh0 Ⅰ限制性内切酶酶切位点.将PCR产物及载体pET-30a用Nde Ⅰ和XhoⅠ双酶切,经1.5％琼脂糖凝胶电泳回收目的片段后在T4连接酶作用下连接,连接产物转化至DH5α感受态细胞并进行PCR鉴定,取阳性菌液提取质粒,经Nde Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切鉴定正确后测序.将合成的基因序列与表达载体pET-30a连接后导入大肠埃希菌BL21 (DE3),加入IPTG诱导表达,经Ni2+ beads亲和层析纯化得到VP8*-His融合蛋白,进行SDS-PAGE电泳分析.利用寡糖结合试验检测目的蛋白与lea、lex、leb、ley、A、B、H1、H2 8种寡糖的结合特性,利用唾液结合试验检测VP8*蛋白与不同血型组织抗原表型唾液的结合特征. 结果 成功构建重组质粒,SDS-PAGE显示目的蛋白相对分子质量约为26×103,与预期的分子质量相符合.寡糖结合试验显示Rotarix和RotaTeq VP8*蛋白能与H1型HBGAs结合,唾液结合试验显示二者能与分泌型唾液结合而不与非分泌型唾液结合. 结论 成功克隆表达了轮状病毒疫苗株Rotarix和RotaTeq VP8*蛋白,两种蛋白均有与H1型HBGAs结合的特性.
其他文献
目的 分析心血管内科患者医院感染的病原菌及相关因素,指导临床疾病治疗. 方法 选取2017-2018年本院收治的436例心血管内科患者临床资料,参照诊断标准并采用全自动微生物鉴定
水轮机组的振动及稳定性对其安全运行有重要意义.水轮机组更换新转轮后,采用随机振动测试方法对机组各部位的振动、摆度及水压力脉动进行了现场实测.实测结果表明,水轮机组改
本文对无粘结预应力混凝土梁中非预应力钢筋锈蚀对构件性能的影响进行试验研究,试验中考虑荷载的持续作用,试验结果表明,非预应力钢筋锈蚀对构件预应力筋的预应力值影响不大,
目的 构建牛乳腺炎无乳链球菌cylE基因缺失突变菌株,为进一步开展其致病机制与免疫机制研究奠定实验基础. 方法 参考GenBank上公布的无乳链球菌cylE基因上、下游序列(AF15701
本文概括了一些碳纤维加固受弯构件研究成果,加固梁承载力分析及破坏形态、抗剥落性能,刚度和承载力计算方法,并对受弯构件进行了可靠度分析.
目的 分析2010-2018年福建省某医院报告法定传染病的流行病学特征,为加强医院传染病管理以及当地传染病的预防和控制措施的制定提供依据. 方法 根据福建医科大学附属第二医院
本文就一古塔整体顶升施工中,因地表水影响施工,故采用水泥土深层搅拌桩做基坑支护和止水帷幕,该方法的采用成功解决了基坑抗渗和基础托换中顶推反力架的问题,保证了金刚塔整
聚氨酯泡沫塑料是一种多孔介质,具有良好的吸能缓冲性能,在军用和民用防护工程领域,具有很好的利用前景.本文介绍了对聚氨酯泡沫塑料进行的实验研究,验证了聚氨酯泡沫塑料的
本文把实验室环境下的开孔试件的S-N曲线同3.5％Nacl水溶液预腐蚀后的开孔试件的S-N曲线以及间接地同大气环境下放置25年的开孔试件的S-N曲线进行了比较,说明了这些S-N曲线在双
随着社会的发展,英语被越来越多的人所重视。在听、说、读、写四种技能中,听是最基础最重要的技能,它是吸收和巩固语言知识和培养说、读、写语言能力的重要手段,也是获取语言