hTERT转录调控区克隆及在人癌细胞的转录特异性分析

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目的通过克隆人癌细胞中端粒酶逆转录酶(hTERT)基因上游转录调控区并观察其在不同人癌细胞和正常细胞中的转录活性,探讨人hTERT基因在细胞癌变中的激活机制.方法用PCR方法克隆HeLa和PG癌细胞hTERT基因转录调控区,并进行DNA序列测定;将转录调控区重组于荧光酶报告载体,瞬时转染人癌细胞HeLa、PG、293和正常人二倍体细胞2BS后,测定荧光酶活性以确定调控区转录活性.结果于人HeLa和PG癌细胞分别克隆hTERT基因转录起始点附近636bp(-531~+90)和950bp(-531~+404)
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