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猪流行性腹泻病毒黑龙江分离株ORF3基因的克隆、表达及分子进化分析

来源 :黑龙江八一农垦大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hopkings

【摘 要】

：

克隆2017年黑龙江省大庆地区流行PEDV毒株（HLJ/DQ/2017）ORF3基因,通过真核表达及分子进化分析方法,为研究ORF3蛋白生物学功能提供重要的实验基础。TRIzol裂解法提取病毒RNA,RT-

【作 者】

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邹德华 郑亮 程丽鑫 李兴志 张雅婷 徐嘉欣 武雪宁 张华 

【机 构】

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黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院

【出 处】

：

黑龙江八一农垦大学学报

【发表日期】

：

2018年3期

【关键词】

：

PEDV ORF3蛋白 载体构建 表达定位 进化分析 PEDV ORF3 protein construction of vector expression a 

【基金项目】

：

黑龙江省自然科学基金面上项目（C201322）, 黑龙江八一农垦大学研究生创新科研项目（YTSCX2016-Y50）

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克隆2017年黑龙江省大庆地区流行PEDV毒株（HLJ/DQ/2017）ORF3基因,通过真核表达及分子进化分析方法,为研究ORF3蛋白生物学功能提供重要的实验基础。TRIzol裂解法提取病毒RNA,RT-PCR技术扩增ORF3基因片段并测序,克隆至p EGFP-N1载体上,转染至HeLa细胞。应用DNAStar、DNAMAN、MEGA5.0软件进行序列比对和发育树绘制,应用Western Blot技术、Immunofluorescence技术检测ORF3蛋白的表达和细胞定位。经过酶切和测序验证p EGF

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