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摘 要：樱花起源于中国，在世界各地都有分布，由于其花色鲜艳美丽，是重要的园林观赏树种之一。目前樱花的繁殖主要以扦插和嫁接为主，生根率比较低，繁育系数也少，采用组织快繁技术可以有效克服这些问题。本文研究了草樱的组培快繁技术，从外植体的消毒及培养基激素浓度的摸索，最终探索出一种草樱的组织培养方法，可以提高其繁育系数，缩短生育周期，可用于大规模工厂化育苗。
关键词：樱花;组培快繁;育苗
樱花（学名：Cerasus sp.）是蔷薇科樱属几种植物的统称， 植株花朵鲜艳美丽，是我国园林绿化中优秀的观花树种[1]。广泛应用于城市街道、小区、校园和河堤等，绿化效果显著。盛花期花朵多，花期长，观赏价值极高，深受人们喜爱。随着樱花在园林绿化建设中的大量应用，市场对樱花工程苗的需求越来越大，常规传统的育苗方法已经远远不能满足生产上的要求。随着现代生物技术的发展，利用植物细胞的全能性进行组织快繁培养，可以大大缩短育种周期和提高繁育系数，而且能保持亲本的优良性状，提升樱花种苗的质量，为市场上快速大规模提供樱花工程苗成为可能，推动我国樱花产业化发展。
1、材料与方法
1.1材料
1.1.1外植体选择
草樱是樱花的一个品种，它是多年生蔷薇科樱属植物，种子繁育比较困难，一般组织培养采用草樱嫩枝繁殖。本实验材料选以3月上旬的草樱嫩枝为外植体。
1.1.2主要试剂
实验所用药品均为国产试剂（AR级）。
1.1.3培养基
分诱导增殖培养基以及生根培养基，前者为： MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 0.1mg/L+白糖30g/L+生物炭3g/L，pH5.8，后者为：1/2MS+IBA 1.0 g/L+白糖30g/L，pH5.8。
1.2方法
1.2.1芽的诱导培养
剪取带有腋芽草樱的嫩枝，用肥皂水清洗后以自来水冲洗1 h，放置于超净工作台上用75%酒精消毒30 s ，10%次氯酸钠消毒6 min，，无菌水反复冲洗4次，，再用无菌滤纸吸干水分，最后接种至诱导增殖培养基。每一瓶培养基接种2-3个嫩枝，放置在组培室中，每半个月换一次培养基，光照强度设置为2000 lux，温度设置为25℃，湿度设置为80%，光照和黑暗时间设定为16 h/ 8 h。
1.2.2生根培养
从嫩枝上将诱导出的幼芽用灭菌刀切下来，转接到生根培养基中，光照强度设置为2000 lux，温度设置为25℃，湿度设置为80%，光照和黑暗时间设定为16 h/ 8 h。
2、结果
组培快繁实验共接种100瓶，污染15瓶，污染率为15%。诱导增殖出芽65瓶，诱导率为65%，死亡20瓶，死亡率为20%。最终成活生根50瓶，生根率为50%。
由于草樱为多年生长植物，外植体灭菌难度较高。75%酒精和高浓度的次氯酸钠会使组织细胞杀死，采用75%浓度的酒精灭菌30s，结合10%次氯酸钠灭菌 6 min，既能杀死细菌又可以保持细胞活性，消毒时间小于5min时污染率会显著提高，而消毒大于8 min 则植物细胞死亡率明显提高。
根据实验观察，将含有腋芽的外植体放在诱导培养基上培养15 d 左右开始出现萌动，每个嫩枝都会展开新叶，30 d左右放在增殖培养基继续培养，到2个月时，幼苗的长度可达到3.0 cm，此时可以进行草樱的诱导生根培养[1]。长出约3-5 cm 的幼苗从外植体切下，转移到生根培养基中进行培养。将已经生根的幼苗移栽到基质中，并盖上塑料杯保湿在光照培养箱中培养，1-2周后转移至人工气候室培养。
3、讨论
近年来，随着园林绿化市场的发展，人们对观花品种的需求量不断加大，樱花由于其花色特别受人们喜欢，因此樱花树种具有较大的市场潜力。樱花花色鲜艳，观赏性极高，开发其组织培养技术不但可以保护樱花种质资源，也为其今后的产业化开发利用提供了可能[2]。
对于樱花组织培养研究来说，消毒方法是组培快繁体系建立的关键[3]。本研究中，以带有腋芽放入多年生嫩茎为外植体，用75%酒精消毒30s 和10%次氯酸钠消毒6min，污染率明显减少[4]。筛研究结果显示，借助芽诱导增殖培养基可以诱导出芽，成功率为65%，利用生根培养基生根，生根率为50%。从结果来看，樱花诱导率以及生根率总体不高，有很大的提升空间，本研究为樱花后续的组织快繁进一步研究提供了一定参考。
参考文献
[1]王文房，李修岭等. 樱花花柄的组织培养[J]. 安徽农业科学， 2006， 34（ 22） ： 5839-5841.
[2]龔玉莲，龚莉红，杜馥燕，等. 朱樱花愈伤组织的诱导. 广州教育学院学报[J].2006 （3）：75-77.
[3]李艳敏，孟月娥，赵秀山，等.赤霉素对樱花组培苗壮苗及生根的影响[J]. 园艺学报，2012（39增刊）： 2749.
[4]刘国顺， 杨丽， 董卉卉， 等. 独花兰组织培养研究[J]. 安徽农业科学， 2003， 41（2）： 9195-9196.
关键词：樱花;组培快繁;育苗
樱花（学名：Cerasus sp.）是蔷薇科樱属几种植物的统称， 植株花朵鲜艳美丽，是我国园林绿化中优秀的观花树种[1]。广泛应用于城市街道、小区、校园和河堤等，绿化效果显著。盛花期花朵多，花期长，观赏价值极高，深受人们喜爱。随着樱花在园林绿化建设中的大量应用，市场对樱花工程苗的需求越来越大，常规传统的育苗方法已经远远不能满足生产上的要求。随着现代生物技术的发展，利用植物细胞的全能性进行组织快繁培养，可以大大缩短育种周期和提高繁育系数，而且能保持亲本的优良性状，提升樱花种苗的质量，为市场上快速大规模提供樱花工程苗成为可能，推动我国樱花产业化发展。
1、材料与方法
1.1材料
1.1.1外植体选择
草樱是樱花的一个品种，它是多年生蔷薇科樱属植物，种子繁育比较困难，一般组织培养采用草樱嫩枝繁殖。本实验材料选以3月上旬的草樱嫩枝为外植体。
1.1.2主要试剂
实验所用药品均为国产试剂（AR级）。
1.1.3培养基
分诱导增殖培养基以及生根培养基，前者为： MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 0.1mg/L+白糖30g/L+生物炭3g/L，pH5.8，后者为：1/2MS+IBA 1.0 g/L+白糖30g/L，pH5.8。
1.2方法
1.2.1芽的诱导培养
剪取带有腋芽草樱的嫩枝，用肥皂水清洗后以自来水冲洗1 h，放置于超净工作台上用75%酒精消毒30 s ，10%次氯酸钠消毒6 min，，无菌水反复冲洗4次，，再用无菌滤纸吸干水分，最后接种至诱导增殖培养基。每一瓶培养基接种2-3个嫩枝，放置在组培室中，每半个月换一次培养基，光照强度设置为2000 lux，温度设置为25℃，湿度设置为80%，光照和黑暗时间设定为16 h/ 8 h。
1.2.2生根培养
从嫩枝上将诱导出的幼芽用灭菌刀切下来，转接到生根培养基中，光照强度设置为2000 lux，温度设置为25℃，湿度设置为80%，光照和黑暗时间设定为16 h/ 8 h。
2、结果
组培快繁实验共接种100瓶，污染15瓶，污染率为15%。诱导增殖出芽65瓶，诱导率为65%，死亡20瓶，死亡率为20%。最终成活生根50瓶，生根率为50%。
由于草樱为多年生长植物，外植体灭菌难度较高。75%酒精和高浓度的次氯酸钠会使组织细胞杀死，采用75%浓度的酒精灭菌30s，结合10%次氯酸钠灭菌 6 min，既能杀死细菌又可以保持细胞活性，消毒时间小于5min时污染率会显著提高，而消毒大于8 min 则植物细胞死亡率明显提高。
根据实验观察，将含有腋芽的外植体放在诱导培养基上培养15 d 左右开始出现萌动，每个嫩枝都会展开新叶，30 d左右放在增殖培养基继续培养，到2个月时，幼苗的长度可达到3.0 cm，此时可以进行草樱的诱导生根培养[1]。长出约3-5 cm 的幼苗从外植体切下，转移到生根培养基中进行培养。将已经生根的幼苗移栽到基质中，并盖上塑料杯保湿在光照培养箱中培养，1-2周后转移至人工气候室培养。
3、讨论
近年来，随着园林绿化市场的发展，人们对观花品种的需求量不断加大，樱花由于其花色特别受人们喜欢，因此樱花树种具有较大的市场潜力。樱花花色鲜艳，观赏性极高，开发其组织培养技术不但可以保护樱花种质资源，也为其今后的产业化开发利用提供了可能[2]。
对于樱花组织培养研究来说，消毒方法是组培快繁体系建立的关键[3]。本研究中，以带有腋芽放入多年生嫩茎为外植体，用75%酒精消毒30s 和10%次氯酸钠消毒6min，污染率明显减少[4]。筛研究结果显示，借助芽诱导增殖培养基可以诱导出芽，成功率为65%，利用生根培养基生根，生根率为50%。从结果来看，樱花诱导率以及生根率总体不高，有很大的提升空间，本研究为樱花后续的组织快繁进一步研究提供了一定参考。
参考文献
[1]王文房，李修岭等. 樱花花柄的组织培养[J]. 安徽农业科学， 2006， 34（ 22） ： 5839-5841.
[2]龔玉莲，龚莉红，杜馥燕，等. 朱樱花愈伤组织的诱导. 广州教育学院学报[J].2006 （3）：75-77.
[3]李艳敏，孟月娥，赵秀山，等.赤霉素对樱花组培苗壮苗及生根的影响[J]. 园艺学报，2012（39增刊）： 2749.
[4]刘国顺， 杨丽， 董卉卉， 等. 独花兰组织培养研究[J]. 安徽农业科学， 2003， 41（2）： 9195-9196.