山菠菜胆碱单氧化物酶基因(CMO)的克隆与分析

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甜菜碱是一类广泛存在于生物体内的渗透保护剂。高等植物中 ,甜菜碱的生物合成经由胆碱→甜菜碱醛→甜菜碱两步反应完成 ,其中第一步反应 ,也是甜菜碱生物合成的限速反应 ,由胆碱单氧化物酶 (CMO)催化。本研究以耐盐植物山菠菜 (Atriplexhortensis)为材料构建了盐胁迫下的cDNA文库 ,用菠菜CMOcDNA为探针从中筛选获得一个长 1 77kb的cDNA克隆 ,测序结果表明该克隆包含一个完整的开放读码框 ,编码一个由 438个氨基酸构成的多肽 ,与菠菜和甜菜CMO的氨基酸序列同源性分别为 81%和 72 %。同菠菜和甜菜中的CMO序列相比 ,山菠菜CMO基因 (AhCMO)也具有保守的Rieske Type[2Fe 2S]簇结合区和保守的多铁原子核结合域。对盐处理条件下山菠菜CMO基因转录水平的研究表明CMO基因在盐胁迫情况下表达量增加约 3倍。将CMO与 35S启动子连接后转化烟草 (Nictianatabacumvar .Xanthi) ,获得了具有一定耐盐性状的转基因植株 ,在 1 2 %NaCl的盐浓度下生长良好。
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