【摘 要】
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目的提取纯化Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)并制备胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型。方法采用胃蛋白酶消化法从鸡胸骨剑突上提取CⅡ,通过DEAE-52纤维树脂处理、NaC l的反复盐析纯化并采用
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目的提取纯化Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)并制备胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型。方法采用胃蛋白酶消化法从鸡胸骨剑突上提取CⅡ,通过DEAE-52纤维树脂处理、NaC l的反复盐析纯化并采用SDS-PAGE鉴定和吸收光谱分析。所提CⅡ加以完全弗氏佐剂采用皮内注射的方法建立大鼠C IA模型。容积法检测大鼠足爪肿胀度并进行评分;HE染色法对关节组织作病理检查;ELISA法检测体内抗CⅡ抗体的含量;放免法检测血清细胞因子IL-1β、TNFα-含量。结果自提的CⅡ与标准品分子量一致,最大吸收峰为226 nm。CIA大鼠足爪的炎症反应强烈,关节肿胀明显;病理检查关节组织可见其组织纤维化,伴有大量炎性细胞浸润;血清中抗CⅡ抗体水平和IL-1β、TNFα-显著升高。结论该方法提纯CⅡ简单、高效,用以制备大鼠CIA模型成功。
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