禽呼肠孤病毒广西分离株σ3基因的克隆和表达

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ASHLEY920
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
采用RT-PCR技术扩增禽呼肠孤病毒广西分离株R1σ3基因,将σ3基因克隆至PGEX-4T-1载体上,测序结果表明插入的片段为σ3目的基因.切下目的基因σ3,重组到含有谷胱甘肽(GST)的融合蛋白质粒表达载体PGEX-4T-1,获得重组质粒经PCR酶切以及序列分析鉴定,表达σ3基因插入的位置,大小和阅码框架均正确,表明成功构建了融合表达载体PGEX-R1-σ3.构建好的重组质粒,经1 mmol/L IPTG诱导,在大肠杆菌DH5α中得到了表达.融合蛋白GST-R1-σ3的分子量为60 ku,以包涵体形式存
其他文献
鹅副粘病毒分离株NA-1经11日龄鸡胚增殖后纯化.提取病毒的基因组RNA,采用RT-PCR扩增出与预期设计的1.7kb大小相符合的特异条带.将扩增产物提纯后克隆入pMD 18-T载体,经纯化、
通过对福氏志贺氏菌的诱导及其诱导耐药菌MIC与β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检测,探讨福氏志贺氏菌对三代头孢菌素的耐药机制。结果表明,随诱导代数的增加,诱导菌对抗
本文分析了计算机公共课教改中引入多媒体教学的现状,探讨了多媒体教学在课堂教学中的优势及存在的问题,结合计算机公共课教学实例,提出了一些改进多媒体教学的措施、提高教
采用微量稀释法(27种药物)和琼脂扩散法(7类药物)分别对临床分离的101株猪源链球菌进行了体外耐药性研究。以美国临床检验标准委员会(CLSI/NCCLS)的临界浓度和抑菌圈直径做为判断标
为了获得安全性好,对出血性大肠杆菌具有良好免疫保护作用的疫苗株,本实验以构建的O157△ler/stx基因缺失突变株为载体,将决定特异性粘附的eae全基因插入到质粒pBR322∷stx 1/2B中
利用DNA重组技术,将绵羊朊病毒正常成熟蛋白基因OvPrP^C插入表达载体pET30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,获得的表达产物为绵羊朊蛋白OvPrP(234256),经SDS—PAGE分析,表达产物以包
通过PCR方法扩增恶臭假单胞杆菌(Pseudomonas putida)H76的转谷氨酰胺酶(transglutaminase,TGase)基因,然后将扩增的约800bp的基因片段克隆到pET-28a(+)表达载体上,构建重组T
猪带绦虫45W基因已被认为是预防猪囊虫病的基因工程疫苗候选基因之一。其中4B基因是45W基因家族中高度保守的一个成员(以下称45W-4B)。本试验将重组于pGEM-3Z载体上的4B基因转
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRV)CH-1a株的GP2蛋白基因进行截短修饰后,克隆于pGEX6p-1载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达。经SDS—PAGE分析发现,融合表达的蛋白rtGP2大小约40Ku,We
根据Kozak原理设计引物,以重组原核表达载体pGEX—TSOL18为模板扩增TSOL18基因,用EcoRⅠ、XhoⅠ酶切后与经相同处理的pVAX1载体连接并转化JM109感受态细胞,经测序证明读码框正确