次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型杂交瘤细胞的快速筛选方法

来源 :南京医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caibh
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 建立一种快速而简便的次黄嘌呤 -氨基喋呤 -胸腺嘧啶 (HAT)敏感型杂交瘤细胞株的筛选方法 ,以缩短二次杂交瘤细胞制备时间。方法 在培养瓶中培养杂交瘤细胞 ,每 2~ 3天倍比提高培养液中 8-氮鸟嘌呤 (8- N)浓度 ,从 1.2 5μg/ ml直至 2 0 μg/ ml,并用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)比较筛选前后抗体吸光度 (A)值。结果 成功地诱导筛选后 ,获得HAT敏感的次黄嘌呤 -鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 (HGPRT)缺陷型杂交瘤细胞 2株 ,均保留分泌单抗功能 ,其单抗 A值与 8- N筛选培养前无明显差异。结论 改进后的筛选方法较常规方法所需时间缩短 1.0~ 2 .5倍 Objective To establish a rapid and simple screening method for hypoxanthine-aminopterin-thymidine (HAT)-sensitive hybridoma cell lines to shorten the preparation time of secondary hybridoma cells. Methods Hybridoma cells were cultured in culture flasks and the concentration of 8-azaguanine (8-N) in the culture fluid was increased every 2 to 3 days, from 1.2 5 μg/ml up to 20 μg/ml, and enzyme-linked immunosorbent assay was used. The test (EL ISA) compares the absorbance (A) values ​​of the antibodies before and after screening. Results Two strains of HAT-sensitive hypoxanthine-guanine phosphoribosyl transferase (HGPRT)-defective hybridoma cells were obtained after successful induction of selection. Both of them retained the function of monoclonal antibody, and the monoclonal antibody A value and 8-N screening culture. No significant difference before. Conclusion The improved screening method is 1.0 to 2.5 times shorter than the conventional method.
其他文献
随着建筑行业的蓬勃发展,社会各界对建筑工程质量的要求也逐渐提高,基于这种情况,施工企业应加强建筑工程项目管理力度,充分认识建筑工程项目管理工作的重要性,以达到提高建
即使中国养老金入市最终放行,但因无论在投资规模还是资产配置上,中国版401K计划均弱于美国版,其对股市的影响也将是雷声大雨点小。    3月19日,全国社会保障基金理事会公布,经国务院批准,社保基金受广东省人民政府委托,投资运营广东省城镇职工基本养老保险结存资金1000亿元。其中,新增资金将更多配置到固定收益类产品中。  始自2011年下半年以来被市场广泛热议的中国版401K计划终于有了实质性动作
目的:观察研究重症监护室患者实施综合护理对机械通气相关性肺炎预防效果.方法:通过临床病历抽选时间段为2017年1月~2019年4月在我院就诊的重症监护室机械通气患者36例作为实
加强建筑工程招投标管理,对保证工程质量和遏制腐败现象起重要作用.文章分析了建筑工程招投标活动中存在的问题,并结合实践提出了加强建筑工程招投标工作的几点建议.
【上榜理由】  4月12日,香港上市公司快意节能发布公告称,李宁公司主席李宁及其兄长李进拟出资7亿港元收购快意节能,此举在公众和评论人看来,乃是从“中国第一代体操王子”成功蜕变为著名运动品牌经营者的李宁,开始迈出了进军绿色能源业的步伐。    快意收购扑朔迷离  4月12日,香港上市公司快意节能发布公告称,李宁公司主席李宁及其兄长李进拟出资7亿港元收购快意节能,按照协议,由李宁及李进各持六成和四成
摘要:今年初,中央决定要在全党开展以“深入学习党章党规,深入学习习近平总书记系列重要讲话,做合格的共产党员”学习教育活动。我院积极响应党的号召,在全院广泛开展“两学一做”活动。做为一名从事人事管理工作的党员,我从思想上受到了较大的震动和影响,同时,人事部门的工作也开展得有声有色。  关键词:“两学一做”活动;医院;人事管理  中图分类号:R197.322 文献识别码:A 文章编号:1001-828
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
期刊
目的:研究与探讨维持性血液透析患者皮肤瘙痒的临床护理要点.方法:选择2017年8月至2019年2月期间我院收治的维持性血液透析并伴有皮肤瘙痒的患者60例作为研究对象,随机分为对
目的 :分析垂体微腺瘤的MRI同层动态增强特征。方法 :对 40例临床怀疑为垂体微腺瘤的病人行同层动态增强MRI扫描 ,并绘出时间 -信号强度曲线图。结果 :40例病人中共检出垂体
莱钢停牌前一天,聪明钱大量吃进获利12%;天士力疑提前泄露年报;科陆电子高管违规交易股票。    “在巨大的利益诱惑面前,总有一些人火中取栗、铤而走险”,近期证监会“零容忍”表态似乎没有足够威慑力,内幕交易现象依旧时有发生。在2月份山钢整合中,济南钢铁(600022.SH,下称“济钢”)和莱钢股份(600102.SH,下称“莱钢”)停牌前,莱钢股票交易量突然放大一倍;近日天士力(600535.SH