论文部分内容阅读
目的：构建含有不同组合细胞培养适应性突变的丙型肝炎病毒（HCV）全长基因组cDNA。方法：根据HCV全长基因组cDNA序列及突变位点设计引物，运用重叠延伸PCR法对ns3和ns5a基因的E1202G、T1280I和S2197P位点进行细胞培养适应性突变，将突变后的片段分别克隆入pBlucscriptIIKS（＋）、pRSET-A载体，经测序正确后，分别连入含有HCV全长cDNA的质粒的H／FL相应位置，置换原未突变片段，并进行PCR及酶切鉴定。结果：经PCR、酶切和DNA序列测定证实。预期位点发生突变，而