枯草杆菌Bacillus sp F26产过氧化氢酶的发酵条件

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从内蒙古呼伦贝尔草原的盐碱湖中分离到的一株低度嗜盐嗜碱细菌Bacillussp F26,能积累高水平过氧化氢酶(CAT)。对Bacillus sp F26发酵产过氧化氢酶的环境与营养条件的研究结果表明,其积累高水平过氧化氢酶的适宜环境条件为:温度37℃,种龄20~22h,接种量5%,装液量50mL/(250mL的摇瓶)。适宜发酵培养基组成(g/L)为:葡萄糖15,牛肉膏10,玉米浆10,酵母膏5,磷酸二氢钾1,氯化镁0.2,氯化钠50,碳酸钠10。采用上述条件进行摇瓶分批发酵实验,发酵20h,过氧化氢酶酶活达到16.32U/mL,细胞干重为4.12g/L。进一步研究发现,在对数生长后期(16h)添加2mmol/L的H2O2可以明显刺激产酶,在5L的发酵罐上进一步以指数速率方式流加H2O2,由于该流加方式可降低H2O2对细胞的毒害作用,过氧化氢酶酶活达到29.89U/mL,与分批发酵相比提高了92.8%。
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