探讨高糖环境下球形脂联素(globular adiponectin,gAd)对大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)单核趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响以及其与脂联素受体(AdipoR)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的关系。
方法体外培养NRK-52E细胞,分为六组:正常对照组(NG,5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG,25 mmol/L葡萄糖)、gAd处理组1~3(gAd 1~3,分别用2 mg/L、5 mg/L、10 mg/L gAd+25 mmol/L葡萄糖)、p38MAPK抑制剂组(SB,10 μmol/L SB203580+25 mmol/L葡萄糖)。分别采用RT-PCR和Real-time PCR法检测MCP-1和AdipoR1/AdipoR2的mRNA表达;Western印迹法检测磷酸化p38MAPK(p-p38 MAPK)、总p38MAPK(t-p38 MAPK)、MCP-1和AdipoR1/AdipoR2的蛋白表达。
结果与NG组相比,HG组MCP-1的mRNA和蛋白表达、p-p38MAPK蛋白表达均明显升高(均P<0.05),t-p38 MAPK无明显变化。gAd处理组及p38MAPK抑制剂组p-p38MAPK、MCP-1的mRNA和蛋白表达明显降低(均P<0.05)。AdipoR1及AdipoR2在NG组均有表达,且AdipoR1的mRNA和蛋白表达均明显高于AdipoR2,差异有统计学意义(均P<0.01)。与NG组比较,HG组及AdipoR2的mRNA和蛋白表达稍低,但差异均无统计学意义(P>0.05)。与HG组比较,gAD处理组AdipoR1的mRNA和蛋白表达均增加(均P<0.01),但AdipoR2的mRNA及蛋白表达无改变(P>0.05)。
结论gAd剂量依赖性抑制高糖诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞MCP-1的高表达,且这种肾脏保护作用是AdipoR1及p38MAPK介导的。