【摘 要】
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目的 探讨表皮生长因子(EGF)对人滋养细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响及其调控MMP-9的机制.方法 (1)在JEG-3滋养细胞中分别加入不同浓度的EGF(0、1、10、20 ng/ml),
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目的 探讨表皮生长因子(EGF)对人滋养细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响及其调控MMP-9的机制.方法 (1)在JEG-3滋养细胞中分别加入不同浓度的EGF(0、1、10、20 ng/ml),培养24 h后收集细胞待测.(2)JEG-3滋养细胞中加入含10 ng/ml的EGF,分别培养0、4、12、24 h后收集细胞待测.(3)根据JEG-3滋养细胞中所加成分不同分组,即无EGF组、EGF刺激组、EGF+抑制剂干预[分别加入p38丝裂原活化激酶(p38MAPK)特异性抑制剂SB203580(EGF+SB203580组)或细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)特异性抑制剂U0126(EGF+U0126组)]、抑制剂干预(分为SB203580干预组和U0126干预组).于1%的血清DMEN培养基中培养24 h,收集各组细胞待测.逆转录(RT)PCR技术检测JEG-3滋养细胞中MMP-9 mRNA的表达,蛋白印迹法检测JEG-3滋养细胞中MMP-9、NF-κB、p38MAPK、P-p38MAPK、ERK及p-ERK蛋白表达.结果 (1)JEG-3滋养细胞中MMP-9 mRNA的表达:经不同浓度EGF处理后,JEG-3滋养细胞中MMP-9 mRNA表达水平随着EGF浓度的升高而增加,其中1、10、20 ng/ml浓度EGF处理的细胞中MMP-9 mRNA表达水平(分别为0.567±0.056、1.392±0.133、1.971±0.067)与0 ng/ml(0.166±0.015)分别比较,差异有统计学意义(P
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