【摘 要】
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本文首次采用有机溶剂/水两液相体系,研究了简单节杆菌(Arthrobacter simplex)游离细胞和固定化细胞对17α—羟基—16β—甲基—孕甾—4,9(11)—二烯—3,20—二酮(HMPDD)的C1,2脱氢。
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本文首次采用有机溶剂/水两液相体系,研究了简单节杆菌(Arthrobacter simplex)游离细胞和固定化细胞对17α—羟基—16β—甲基—孕甾—4,9(11)—二烯—3,20—二酮(HMPDD)的C1,2脱氢。 测定了HMPDD和17α—羟基—16β—甲基—孕甾—1,4,9(11)—三烯—3,20—二酮(HMPTD)在十二种有机溶剂中的溶解度。结果表明苯、甲苯、二甲苯、乙酸乙酯和乙酸丁酯对HMPDD和HMPTD的溶解度较大,其中,乙酸乙酯对HMPDD和HMPTD的溶解度最大,分别为39.7g/L和87.5g/L,乙酸丁酯其次,分别为32.6g/L和53.4g/L。随后,考察了这五种溶剂对简单节杆菌存活率的影响,在这五种溶剂中,二甲苯对简单节杆菌细胞的影响最小。最后,比较了这五种溶剂与水组成的两液相体系(两相体积比为1:1)中,游离简单节杆菌细胞对HMPDD的C1,2脱氢,发现在以乙酸丁酯为有机相的两液相体系中,HMPDD的转化率最高,为51.8%。 在乙酸丁酯/水两液相体系中,研究了影响简单节杆菌游离细胞对HMPDD转化的因素,结果表明底物浓度、维生素K3加量、转化时间、摇床转速等因素对HMPDD的转化率有很大影响。采用响应面法对游离细胞转化工艺条件进行了优化,在优化条件下,HMPDD的转化率达生物化工硕士论文摘要到了73.3%,较未优化前有显著提高。 在乙酸丁酉旨水两液相体系中,研究了简单节杆菌固定化细胞对HMPDD的转化。通过四种固定化方法的综合比较,最终选择了海藻酸钙包埋法。对固定化条件、固定化细胞增殖时间、增殖培养基中的磷酸盐浓度以及固定化简单节杆菌细胞对HMPDD的转化工艺条件进行了优化。 此外,为了满足分析的需要,根据HMPDD和HMPTD的光学性质,构建了一种简便的HMPTD含量测定方法。
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