猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白间接ELISA检测方法的建立及应用

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hwcf
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为建立一种敏感、特异、快速的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体检测方法,本研究利用原核表达技术表达了PRRSV N蛋白,亲和层析纯化后作为包被抗原,通过对各反应条件优化选择,建立了PRRSV血清抗体的间接ELISA检测方法,并进行了交叉反应和重复性试验,以及同类成品试剂盒间的应用效果对比试验。最终确定了抗原包被最佳浓度为2μg/mL,血清最佳稀释度为1∶100,血清及酶标二抗孵育时间均为30min,显色时间为10min,检测猪瘟病毒、猪圆环病毒、猪伪狂犬病病毒等5种常见猪病病原的阳性血清均为阴性;该
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