【摘 要】
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目的研究抑制FOXD1基因的表达对结直肠癌细胞放射敏感性的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测人结直肠癌组织和细胞中FOXD1 mRNA和蛋白的表达。对结直肠癌HCT116细胞行梯度剂量(0、2、4、6 Gy)X射线照射，qRT-PCR和Western blot检测各组细胞中FOXD1的表达。将siRNA阴性对照和FOXD1 siRNA转染至结直肠
【机 构】
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473000 南阳，郑州大学附属南阳医院 南阳市中心医院消化内科,430022 武汉，华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺外科,473000 南阳，郑州大学附属南阳医院 南阳市中心医院放疗科,473
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目的研究抑制FOXD1基因的表达对结直肠癌细胞放射敏感性的影响。
方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测人结直肠癌组织和细胞中FOXD1 mRNA和蛋白的表达。对结直肠癌HCT116细胞行梯度剂量(0、2、4、6 Gy)X射线照射，qRT-PCR和Western blot检测各组细胞中FOXD1的表达。将siRNA阴性对照和FOXD1 siRNA转染至结直肠癌细胞中，分别记为si-NC组和si-FOXD1组，经4 Gy的X射线照射处理后记为si-NC＋4 Gy组和si-FOXD1＋4 Gy组，Western blot检测各组细胞中FOXD1的表达，四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞的增殖活性，克隆形成实验检测各组细胞存活率，采用TECT DNA-PK试剂盒检测各组细胞中DNA-PK活性，将转染的结直肠癌细胞接种于BALB/c裸鼠建立移植瘤模型，进行射线照射后，检测各组肿瘤的体积和质量变化。
结果与癌旁正常组织相比，结直肠癌组织中FOXD1 mRNA和蛋白的表达均显著增加(t＝5.579、4.816, P<0.05)，与结肠黏膜上皮细胞NCM460相比，结直肠癌细胞株中FOXD1 mRNA(t＝5.85～17.62, P<0.05)和蛋白(t＝9.04～11.42, P<0.05)表达均显著升高。结直肠癌细胞HCT116中FOXD1的表达量随着放射剂量增加而升高，呈现剂量依赖性，差异有统计学意义(t＝9.13～44.15, P<0.05)。转染si-FOXD1能够有效地抑制结直肠癌细胞中FOXD1的表达(t＝10.51, P<0.05)，FOXD1敲低后能够抑制结直肠癌细胞的增殖活性(t＝10.41, P<0.05)，提高结直肠癌细胞的放射敏感性，放射增敏比为1.797，降低放射诱导的DNA-PK的活性(t＝6.20, P<0.05)。抑制FOXD1的表达经射线照射后，裸鼠种植瘤体积和重量明显减小(t＝11.29、3.69, P<0.05)。
结论抑制FOXD1基因的表达能够提高结直肠癌细胞的放射敏感性，抑制结直肠癌裸鼠移植瘤的生长，可为改善放射治疗对结直肠癌患者的治疗效果提供潜在的靶向基因。
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