烟草青枯病生防菌黑曲霉发酵条件优化研究

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以烟草青枯菌Ralstonia solanacearum为指示菌,黑曲霉Aspergillus niger对其的抑菌圈直径为响应值,运用单因素试验、Plackett-Burman(PB)设计、Box-Behnken(BBD)设计及响应面Response Surface Methodology(RSM)分析将分离并鉴定的黑曲霉菌株的液体发酵条件进行了优化。通过单因素试验确定麦芽糖和麦麸分别为最适碳源和氮源,通过Plackett-Burman设计对培养基中相关影响因素的效应进行评价,并筛选出有显著正效应的MgSO4及有显著负效应的CaCl2和吐温80等3个因素,使用最陡爬坡路径逼近最大抑菌圈直径,最后用BBD设计及RSM分析确定了主要影响因素的最佳条件。结果显示,经过优化的培养基组分为麦芽糖25.00 g/L、MgSO40.38 g/L、K2HPO40.10 g/L、KCl 0.50 g/L、CaCl20.05g/L、FeSO40.20 g/L、麦麸8.50 g/L、酵母膏1.50 g/L、吐温80 0.46 mL/L。采用滤纸片扩散法检测优化后的发酵液抗菌活性,抑菌圈直径为37.49(±0.34)mm,比未经优化测得的抑菌圈直径24.79(±0.72)mm增大了51.23%。
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