【摘 要】
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为制备猫传染性腹膜炎病毒N蛋白特异性多克隆抗体，研究根据HLJ/HRB/2016/11毒株N基因序列设计引物，通过PCR进行基因扩增，并将目的基因在Bam HⅠ、HindⅢ酶切位点克隆至pET32a（+）原核表达载体上，将其转化到BL21（DE3）感受态细胞，经终浓度为1 mmol·L-1的IPTG在16℃诱导16 h后，SDS-PAGE检测表达产物，结果显示，在约69 kda处出现目的条带，且该
【基金项目】
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黑龙江八一农垦大学三横三纵科研团队支持计划（TDJH201804）；
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为制备猫传染性腹膜炎病毒N蛋白特异性多克隆抗体，研究根据HLJ/HRB/2016/11毒株N基因序列设计引物，通过PCR进行基因扩增，并将目的基因在Bam HⅠ、HindⅢ酶切位点克隆至pET32a（+）原核表达载体上，将其转化到BL21（DE3）感受态细胞，经终浓度为1 mmol·L-1的IPTG在16℃诱导16 h后，SDS-PAGE检测表达产物，结果显示，在约69 kda处出现目的条带，且该蛋白主要以可溶形式表达。将重组N蛋白经Ni柱纯化后，按每只BALB/c小鼠免疫50μg，三免后7 d采血分离血清，经间接ELSA检测结果显示，获得的N蛋白可被特异性识别且效价可达到1∶12 800。研究制备的猫传染性腹膜炎病毒N蛋白及其多克隆抗体为后续猫传染性腹膜炎的疫苗提供基础。
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