转粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因真核表达质粒的构建及生物学活性鉴定

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目的 构建小鼠转粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(mGM—CSF)真核表达质粒pcDNA3.GM-CSF,转染红白血病细胞系FBL-3.并鉴定其活性。方法 采用分子克隆技术.构建mGM-CSF真核表达质粒peDNA3GM-CSF,电穿孔法将其导入红白血病细胞系FBL-3,G418筛选G418抗性细胞,限制性稀释法筛选G418抗性细胞克隆。PCR和RT—PCR方法鉴定GM-CSF基因整合和稳定表达。骨艇造血祖细胞增殖实验和骨髓造血祖细胞集落刺激实验鉴定其生物学活性。结果 采用PCR方法扩增mGM-CSFeDNA
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