【摘 要】
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目的:探讨miR-155在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其对NSCLC细胞增殖、迁移、侵袭的影响机制.方法:通过生物信息学网站预测miR-155的可能靶基因,双荧光素酶报告基因实验进行验证;采用qRT-PCR测定NSCLC组织及细胞中miR-155和ZIC3的表达;通过LipofectamineTM2000试剂盒向A549细胞中分别转染miR-155 mimic和mimic NC,共转染miR-155 mimic+pMIR-ZIC3;Western blot检测转染miR-155 mimic对ZIC
【机 构】
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河南中医药大学人民医院(郑州市人民医院)呼吸内科,河南 郑州 450000
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目的:探讨miR-155在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其对NSCLC细胞增殖、迁移、侵袭的影响机制.方法:通过生物信息学网站预测miR-155的可能靶基因,双荧光素酶报告基因实验进行验证;采用qRT-PCR测定NSCLC组织及细胞中miR-155和ZIC3的表达;通过LipofectamineTM2000试剂盒向A549细胞中分别转染miR-155 mimic和mimic NC,共转染miR-155 mimic+pMIR-ZIC3;Western blot检测转染miR-155 mimic对ZIC3蛋白表达的影响;MTT法、划痕实验及Transwell侵袭实验分别检测miR-155对A549细胞增殖、迁移及侵袭的影响.结果:生物信息学网站预测显示ZIC3-3\'UTR与miR-155存在结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证ZIC3是miR-155的靶基因,ZIC3表达受miR-155的负向调控.NSCLC组织及细胞中miR-155显著低表达,ZIC3显著高表达(P<0.05);过表达miR-155抑制了ZIC3蛋白的表达水平(P<0.05).转染miR-155 mimic显著抑制NSCLC细胞的增殖、迁移及侵袭能力(P<0.01);共转染miR-155 mimic+pMIR-ZIC3逆转了miR-155 mimic对NSCLC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用(P<0.05).结论:NSCLC中miR-155显著低表达,其过表达可抑制NSCLC细胞的增殖、迁移及侵袭;miR-155可能通过靶向负调控ZIC3影响NSCLC细胞的生物学行为.
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