下调SUZ12抑制人宫颈癌细胞的增殖及作用机制

来源 :中国热带医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:candy136892
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目的 探讨下调SUZ12表达对人宫颈癌细胞增殖的影响及其作用机制.方法 通过RNAi(RNA干扰技术)下调SUZ12和Cdc25C蛋白的表达,通过慢病毒转染法对Hela细胞构建Cdc25C蛋白过表达及其对照细胞株,并用含嘌呤霉素培养基进行为期14d的筛选,荧光拍照检测绿色荧光蛋白以及Western Blot法进行验证;MTT法检测下调SUZ12和Cdc25C蛋白对细胞增殖的影响;Western Blot法检测下调SUZ12表达后蛋白表达量的改变.结果 MTT结果显示,siSUZ12组中Hela及SiHa的增殖率远低于对照组,细胞增殖明显受到抑制,Hela的生存率为(60.65±7.64)%(P<0.01),SiHa的生存率为(73.81±9.30)%(P<0.01).时效研究结果显示,转染siSUZ12后,Hela细胞在转染第2天后开始出现抑制,其中第5天最为明显,生存率为(56.13±7.78)%(P< 0.01);SiHa细胞在转染第1天后开始出现抑制,其中第5天最为明显,生存率为(70.50±3.15)%(P< 0.01).细胞周期结果显示,Hela细胞在siSUZ 12作用48 h后,G0/G1期的比例明显增加(P<0.05),细胞发生G1/S期阻滞.SiHa细胞在siSUZ12作用60h后,G2/M期细胞数比例显著升高(P<0.01),细胞发生G2/M期阻滞.Western Blot结果显示,下调SUZ12表达后,细胞内Cdc25C的表达明显被抑制.阻断Cdc25C的表达后能显著拮抗siSUZ12对Hela、SiHa细胞的抑制作用,而过表达Cdc25C能降低siSUZ12对细胞的抑制作用.结论 下调SUZ12能通过干扰Cdc25C的表达,产生抑制人宫颈癌细胞增殖的作用.
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