【摘 要】
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为研究白细胞介素-12在机体免疫应答中的作用,从猪外周血提取单个核细胞(PBMCs),用含LPS的培养基培养细胞,从培养2 h和12h的活化细胞中分别提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出编码
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
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为研究白细胞介素-12在机体免疫应答中的作用,从猪外周血提取单个核细胞(PBMCs),用含LPS的培养基培养细胞,从培养2 h和12h的活化细胞中分别提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出编码猪IL-12两个亚基的基因,其大小分别为720 bp(P35)和1 044 bp(P40),将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,回收纯化,用SacI和SdI双酶切后,分别将其连接至pUC18质粒上,进行质粒PCR和SacI、SdI双酶切鉴定后筛选阳性克隆,并进行序列测定和分析.序列分析表明P35基因开放阅读框含有669个核
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