【摘 要】
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目的探讨骨桥蛋白(OPN)在乳腺癌细胞血管生成拟态(VM)的形成中的作用,及其与MMP-9和血管内皮生长因子(VEGF)的关系。方法实验分为转染组(miR-opn2组)和3个对照组[正常对照组(
【机 构】
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南昌大学医学院生物化学与分子生物学教研室,抚州市第一人民医院检验科
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目的探讨骨桥蛋白(OPN)在乳腺癌细胞血管生成拟态(VM)的形成中的作用,及其与MMP-9和血管内皮生长因子(VEGF)的关系。方法实验分为转染组(miR-opn2组)和3个对照组[正常对照组(control组)、转染试剂对照组(LipLTX组)、阴性质粒对照组(miR-neg组)],分别转染MDA-MB-231细胞株30h后,收集细胞进行体外三维培养,24h后行PAS染色,显微镜下观察各组VM的数量,提取各实验组细胞,采用RT-PCR、WesternBlot测定OPN、MMP-9和VEGF的mRNA和蛋白质的表达。结果 miR-opn2组的MDA-MB-231细胞株形成VM的数量,OPN、MMP-9和VEGF的mRNA和蛋白表达水平较3个对照组的明显减少(P<0.05),3个对照组组间相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论体外三维培养模式中人乳腺癌细胞株MDA-MB-231能够形成典型VM现象,靶向沉默OPN蛋白能够有效抑制体外三维培养模式中MDA-MB-231形成VM的数量,可能与其下调了VM相关蛋白MMP-9和VEGF的表达有关。
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