运用多种策略改良差异显示PCR

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【摘要】

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目的:改进差异显示PCR技术,提高其在筛选差异表达基因方面的效率.方法:①采用单碱基铆钉引物;②增加引物长度;③提高PCR反应的严谨性;④应用同步重复测序电泳.结果:减少了经

【作者】

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王光海邹飞

【机构】

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第一军医大学高温医学研究室

【出处】

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生物技术

【发表日期】

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2001年6期

【关键词】

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差异显示PCR 改良差异表达基因 differential display PCR gene

【基金项目】

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教育部高校骨干教师资助计划，军队指令性课题

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目的:改进差异显示PCR技术,提高其在筛选差异表达基因方面的效率.方法:①采用单碱基铆钉引物;②增加引物长度;③提高PCR反应的严谨性;④应用同步重复测序电泳.结果:减少了经典方法的工作量,降低了非特异性和假阳性率.用改良技术研究热适应大鼠下丘脑基因的差异表达,发现了一个差异表达基因片段,斑点杂交证实为阳性片段.结论:改进后的差异显示PCR技术是一种研究基因差异表达从而发现新基因或基因新功能的有效方法.

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