论文部分内容阅读
目的：构建重组人HSPb1真核表达载体质粒，为研究HSPb1与乳腺癌发生和化疗耐药的关系做准备。方法：从人乳腺癌细胞MCF-7中提取总RNA，RT-PCR法反转录合成cDNA。设计引物调取目的基因片段，与T载体连接后转化大肠埃希菌DH-5α，筛选菌落并抽提质粒。测序正确后双酶切克隆进入真核表达载体pcDNA3．1中，得到重组质粒pcDNA3．1-HSPbl。用pcDNA3．1-HSPb1转染人乳腺癌细胞MDA-MA-231，RT-PCR法和Westernblot法鉴定重组质粒在其中的表达。结果：经酶切证实