DON对体外培养软骨细胞炎性细胞因子、CD44、MMP-13及整合素表达的影响

来源 :中华地方病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lzmkkaa
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对体外培养软骨细胞炎性细胞因子、人类白细胞分化抗原(CD)44、基质金属蛋白酶(MMP)-13、整合素表达的影响。方法:提取1 ~ 2日龄Wistar乳鼠原代软骨细胞,采用甲苯胺蓝染色法进行软骨细胞鉴定,CCK-8法检测DON(剂量分别为0.0、0.1、0.2、0.4、0.8 μg/ml)染毒24、48、72 h软骨细胞增殖情况,根据细胞存活率选取0.00(对照)、0.05、0.10、0.15、0.20 μg/ml DON用于后续实验,确定作用时间为48 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养上清液白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、CD44及MMP-13含量;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测软骨细胞CD44和整合素α2、α5、β1蛋白表达水平。结果:随着DON剂量和作用时间增加,软骨细胞存活率逐渐降低,存在浓度和时间依赖性(n P均< 0.01)。细胞培养上清液IL-6含量组间比较差异有统计学意义(n H = 13.425,n P < 0.01),其中0.10 μg/ml组[中位数(四分位数间距):256.89(191.02,477.58)pg/ml]显著高于对照组[10.37(0.00,119.13)pg/ml, n P 0.05);0.10、0.15、0.20 μg/ml组CD44含量[(0.87 ± 0.21)、(0.85 ± 0.24)、(0.77 ± 0.17)pg/ml]明显低于对照组[(1.06 ± 0.19)pg/ml,n P均< 0.05];MMP-13含量组间比较差异有统计学意义(n F = 7.947,n P < 0.01)。CD44和整合素α2、α5、β1蛋白表达水平组间比较差异有统计学意义( n F = 5.737、6.562、6.074、4.476,n P < 0.05或< 0.01)。n 结论:DON可能通过增加IL-6,MMP-13,整合素α2、β1表达和抑制CD44、整合素α5表达,破坏细胞与细胞外基质间的平衡,造成软骨损伤。“,”Objective:To observe the effects of deoxynivalenol (DON) on the expression of chondrocyte inflammatory cytokines, cluster of differentiation (CD) 44, matrix metalloproteinase (MMP)-13 and integrin n in vitro.n Methods:Primary chondrocytes from Wistar rats aged 1 to 2 days were isolated, and the chondrocytes were identified by toluidine blue staining. The effects of DON (dose groups of 0.0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.8 μg/ml) on proliferation of chondrocytes were detected by CCK-8 method for 24, 48 and 72 h. According to the cell survival rate, the DON concentrations [0.00 (control), 0.05, 0.10, 0.15, 0.20 μg/ml] were selected for subsequent experiments, and the exposure time was 48 h. The contents of interleukin (IL)-6, IL-1β, tumor necrosis factors (TNF)-α, CD44 and MMP-13 in the cell culture supernatant were detected by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) kit. The expression levels of CD44 and integrin subunits α2, α5, and β1 protein in chondrocytes were detected by Western blotting.Results:The survival rate of chondrocytes decreased with the increase of DON concentrations and time (n P < 0.01). There were statistically significant differences in IL-6 content between different groups ( n H = 13.425, n P < 0.01), and 0.10 μg/ml group [256.89 (191.02, 477.58) pg/ml] was significantly higher than that of the control group [10.37 (0.00, 119.13) pg/ml, n P 0.05). The CD44 contents in 0.10, 0.15, and 0.20 μg/ml groups [(0.87 ± 0.21), (0.85 ± 0.24), (0.77 ± 0.17) pg/ml] were lower than that in the control group [(1.06 ± 0.19) pg/ml, n P < 0.05]. There were statistically significant differences in MMP-13 expression between the groups ( n F = 7.947, n P < 0.01). There were statistically significant differences in protein expression of CD44, integrin subunits α2, α5 and β1 between the groups ( n F = 5.737, 6.562, 6.074, 4.476, n P < 0.05 or < 0.01).n Conclusion:DON may disrupt the balance between cells and extracellular matrix by increasing the expression of IL-6, MMP-13, integrin subunits α2 and β1, and inhibiting the expression of CD44 and integrin subunit α5, thus causing cartilage injury.
其他文献
本文通过对荣华二采区10
本文通过对荣华二采区10
总结江苏省高校图书馆计算机应用的三次迁移,以及JALIS联盟成立以来的历史经验,特别是近5年来的变化.从全球技术发展的视角,对比10年来的创新成果,分析江苏省高校图书馆计算
刘春霖,“第一人中最后人”。早年于保定莲池书院师事著名学者吴汝纶十余年,在古文学、史学和金石学等方面颇有造诣。他在保定等地开设“直隶书局”数处,藏书万册以上,多善本
武汉为华中重镇 长江、 汉水将市区分割为武昌、汉口、汉阳三部分,城市交通发展受到制约。为适应城市功能、经济的发展,武汉市正在构建城市快速 Wuhan is the center of the
日益进步的科学技术推动社会各行业稳步前进,极为行业发展带来机遇,同时又带来挑战.城市化建设是新时代经济发展背景下的突出特点,城市用地日益紧张,高层和超高层建筑物层出
【摘要】英语阅读是英语学习的一个重要组成部分,掌握好英语阅读技能不仅可以打好英语阅读基础,更能提升英语综合应用能力。本文将对阅读模式SQ3R展开讨论,分析该模式在英语阅读中的优势与不足。  【关键词】英语阅读 SQ3R 优势 不足  一、SQ3R内涵  SQ3R是美国俄亥俄州立大学心理学教授F.P.Robinson于1946年提出的一套阅读方法。该方法注重学习者的主观能动性,在我国受到不少英语教学
《北京历史文化名城保护规划》中,水系保护已作为一个专项规划,向人们展示出了未来城市发展的思路。在东长安街庄严的红墙下,一度被盖上盖板的菖蒲河将于今年8月在天安门至南
语文素质在一个人的综合素质结构中是一种基础性的素质,对于其他素质的形成和发展具有重大的影响力,所以不论是学校领导、教师,还是家长、学生都必须予以重视。 Language qu
为了保证化学实验教学水平,提高本科人才培养质量,2006-2010年教育部高等学校化学类专业教学指导分委员会于2011年制订并出版了《高等学校化学类专业指导性专业规范》(以下简
期刊