目的:构建人锌转运体8(Zinc transporter 8,Zn T-8)羧基端原核表达载体,表达和纯化人Zn T-8羧基端(Zn T-8-COOH)重组蛋白,为寻找1型糖尿病新型免疫调节剂创造条件。方法:人Zn T-8-COOH c DNA克隆入p ET-32a载体,在大肠杆菌BL21中利用异丙基-硫代-β-D-半乳糖苷(isopropyl-thio-β-D-galactoside,IPTG)诱导表达,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot鉴定表达产物,镍离子亲和层析纯化重组蛋白。40只4周龄的雌性非肥胖型糖尿病(non obese diabetic,NOD)小鼠随机分为Zn T-8重组蛋白预处理组及生理盐水对照组,分别腹腔注射Zn T-8重组蛋白和生理盐水,每周测量各组NOD小鼠体质量,检测血糖、血清C肽水平。结果:经PCR扩增后得到306 bp的DNA片段,成功构建到p ET-32a表达载体上,经测序分析序列正确;Zn T-8重组蛋白在大肠杆BL21中获得成功表达,并得以有效纯化。Zn T-8重组蛋白预处理组NOD小鼠与生理盐水对照组相比,28周龄时Zn T-8重组蛋白预处理组的体质量高于生理盐水对照组(P<0.05)。28周龄时Zn T-8重组蛋白预处理组的血糖低于生理盐水对照组(P<0.05);28周龄时Zn T-8重组蛋白预处理组的血清C肽水平高于生理盐水对照组(P<0.05)。结论:成功制备人Zn T-8-COOH重组蛋白,并初步证实了其对1型糖尿病的免疫调节作用。