探讨背根神经节(DRG)锌指和同源框蛋白家族(ZHX)在外周神经损伤痛觉过敏中的作用,为神经病理性疼痛(NP)的分子生物学机制提供新的思路。
方法(1)24只8周龄雄性C57BL6小鼠,按随机数字表法分为坐骨神经慢性缩窄性损伤模型(CCI)组、假手术组,每组12只,造模前1 d、造模后7 d检测小鼠机械缩爪反应频率(PWF)和热缩爪反应潜伏期(PWL)的变化。造模后7 d采用反转录实时定量PCR(RT-qPCR)检测小鼠DRG ZHX1、ZHX2、ZHX3 mRNA的表达;采用Western blotting检测小鼠DRG ZHX2蛋白的表达。(2)36只8周龄雄性C57BL6小鼠,按随机数字表法分为DRG内注射等剂量溶剂、无义阴性对照序列(siNC)、ZHX2小干扰RNA(siRNA)的CCI组和DRG内注射等剂量溶剂、siNC、ZHX2 siRNA的假手术组,每组6只。注射药物前1 d、注射药物后7 d观察6组小鼠机械缩爪反应频率(PWF)和热缩爪反应潜伏期(PWL)的变化;RT-qPCR检测小鼠DRG ZHX2 mRNA的表达。
结果(1)造模后7 d,与假手术组患侧比较,CCI组小鼠患侧后爪PWF明显增加、PWL明显缩短,差异均有统计学意义(P<0.05);与假手术组比较,CCI组小鼠DRG ZHX2 mRNA的表达增加1.71倍,差异有统计学意义(P<0.05);与假手术组患侧比较,CCI组小鼠患侧DRG ZHX2蛋白的表达增加2.15倍,差异有统计学意义(P<0.05);(2)与注射溶剂、siNC、siRNA的假手术组比较,注射溶剂、siNC的CCI组小鼠患侧PWF增加、PWL降低、DRG ZHX2 mRNA的表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与注射溶剂、siNC的CCI组比较,注射siRNA的CCI组小鼠患侧PWF降低、PWL增加、DRG ZHX2 mRNA的表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论外周神经损伤上调受损DRG内ZHX2的表达,抑制ZHX2高表达可缓解神经损伤引起的痛觉过敏行为。