【摘 要】
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为深入研究流行性乙型脑炎病毒C蛋白,通过PCR扩增乙脑病毒P3株的C基因,并构建了其融合表达His标签的原核表达载体,测序鉴定并分析了其核苷酸序列特征和氨基酸结构特征。将重
【机 构】
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塔里木大学生命科学学院; 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室; 塔里木大学动物科学学院;
【基金项目】
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塔里木大学大学生创新创业项目“流行性乙型脑炎NS1蛋白与宿主细胞互作蛋白的筛选及鉴定”(201610757015)
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为深入研究流行性乙型脑炎病毒C蛋白,通过PCR扩增乙脑病毒P3株的C基因,并构建了其融合表达His标签的原核表达载体,测序鉴定并分析了其核苷酸序列特征和氨基酸结构特征。将重组质粒转化大肠杆菌BL21,并诱导表达了C蛋白,用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果成功扩增并构建了C基因的原核表达载体p ET-42b-JEV-C,P3株C基因全长381 bp,与参考株同源性为97. 64%,推测表达约13 k Da蛋白,预测的二级结构以中间大量的a-螺旋和两侧的β-折叠和少量无规卷曲为特点,C蛋白以包涵体的形式表达,大小与理论相符,Western Blot结果证明C蛋白与His标签确实进行了融合表达。结果表明JEV-C基因可以用原核表达系统高效表达,为后期生物学功能研究奠定基础。
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