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摘 要：为了选育出抗病性强的丝瓜新品种，课题组从国内外收集了43个丝瓜种质资源，采用室内人工接菌的方法对其进行枯萎病抗性鉴定与评价，结果表明：春秋⊕21/白籽、2012-2-1-⊕5选、2012-2-4-⊕9-5、七美-⊕10、2012-2-1-⊕5选和2012-2-4-⊕9-5等6个丝瓜种质资源对枯萎病表现为高抗，三叶香嫩⊕20、翠霜-⊕19-2.5.6、绿优-⊕13/深绿等21个丝瓜种质资源对枯萎病表现为抗病，台湾-⊕8、名家短丝瓜⊕4、2012-2-⊕3选等12个丝瓜种质资源对枯萎病表现为中抗，日本早杂王⊕11、2012-2-⊕1-2.3、09-1-⊕1等4个丝瓜种质资源对枯萎病表现为感病。综合以上分析表明43个丝瓜种质资源中有27个种质资源对枯萎病表现为抗级以上，占总数的62.8%。
关键词：丝瓜品种资源;丝瓜枯萎病;抗病性;鉴定;评价
中图分类号：S 641.2 文献标志码：A 文章编号：0253-2301（2021）05-0028-05
DOI： 10.13651/j.cnki.fjnykj.2021.05.006
Identification and Evaluation of the Resistance of 43 Luffa CylindricaGermplasm Resources to Fusarium Wilt
LIN Yong-sheng， ZHANG Wu-jun， ZHOU Xian-zhi， CHEN Yang， ZHANG Yu-can*
（Institute of Agricultural Biological Resources， Fujian Academy of Agricultural Sciences， Fuzhou， Fujian 350003， China）
Abstract： In order to breed the new varieties of Luffa cylindrica with strong disease resistance， 43 germplasm resources of Luffa cylindrica were collected from home and abroad by the research team， and the method of indoor artificial inoculation was used to identify and evaluate their resistance to fusarium wilt. The results showed that： the 6 germplasm resources of Luffa cylindrica including Chunqiu ⊕21/ baizi， 2012-2-1-⊕5 xuan， 2012-2-4-⊕9-5， Qimei-⊕10， 2012-2-1-⊕5 xuan， and 2012-2-4-⊕9-5 showed high resistance to fusarium wilt; the 21 germplasm resources of Luffa cylindrica， such as Sanyexiangnen ⊕20， Cuishuang -⊕19-2.5.6， Lvyou -⊕13/ shenlv， etc.， showed resistance to fusarium wilt; the 12 germplasm resources of Luffa cylindrica， such as Taiwan -⊕8， Mingjiaduansigua ⊕4， and 2012-2-⊕3 xuan， etc.， showed moderate resistance to fusarium wilt; and the 4 germplasm resources of Luffa cylindrica， such as Japan Zaozawang⊕11， 2012-2-⊕1-2.3， and 09-1-⊕1， etc.， were susceptible to fusarium wilt. Based on the above analysis， 27 of the 43 germplasm resources of Luffa cylindrica showed higher resistance to fusarium wilt， accounting for 62.8% of the total.
Key words： Germplasm resources of Luffa cylindrica;Fusarium wilt;Disease resistance;Identification;Evaluation
絲瓜Luffa cylindrica在我国南方地区栽培历史悠久，在全国各地均有种植，是我国夏秋季的主要蔬菜种类之一。枯萎病是丝瓜生产上的主要病害之一，又称蔓割病、萎凋病，是一种世界性的瓜类土传病害，对丝瓜的产量与品质影响很大。该病害是由尖镰孢丝瓜专化型Fusarium oxysporum Schl. f.sp.luffae Kwai Suzki et Kawai侵染所致[1]，病原菌会不断进化出新的生理小种，且能以菌核、厚垣孢子在土壤、病残体、种子中越冬，在土壤中腐生性强，能存活5年或更长的时间，使得枯萎病的防治非常困难[2]。化学防治效果普遍不佳，且大量使用容易造成环境污染和农药残留超标[3-7];与禾本科和豆科作物轮作虽然效果好，但福建省耕地面积有限，且禾本科和豆科非福建省主栽作物品种，田间实施可操作性不大[8-10];土壤改良、高温消毒和无土栽培等措施虽能有效减轻瓜类枯萎病的危害[11-13]，但通常成本较高，其田间实际应用情况较少;为此，选育和种植抗病品种是目前防治该病最有效、最经济的措施。本项目课题组对43个丝瓜种质资源开展抗枯萎病鉴定与评价，筛选出抗病性强的种质资源，为丝瓜抗病育种提供抗病亲本，并进行有针对性的抗病育种，从而有效缩短抗病育种历程，以期早日选育出抗病性强的丝瓜新品种。 1 材料与方法
1.1 试验材料
本课题组自2003年起，从国外的日本、泰国及国内的福建、台湾、湖南、海南、广东等地收集丝瓜种质资源，多数为杂交一代种子，经过17年的试种、观察、自交、纯化和定向选择，筛选出43个各具特色的丝瓜稳定自交系。
1.2 供鉴定的病原菌菌株
由福建省农业科学院农业生物资源研究所微生物中心提供，菌种名称为FJAT-32796，具有强致病性，是从福建省福州市永泰县白云乡的苦瓜枯萎病发病植株的嫁接砧木银砧1号上分离出来的。
1.3 苦瓜枯萎病鉴定用菌液的制备
先将枯萎病病菌接种于PDA培养基上，在25℃的培养箱中培养7 d，再将活化后的枯萎病菌接菌到PDA液体培养基中，然后置于 25℃、180 r·min-1振蕩培养7 d，之后再用双层纱布过滤去菌丝，以2500～3000 r·min-1 离心 10 min，去上清液，用无菌水洗出沉淀的孢子制成母液，经血球计数器将母液用无菌水调至5×106个·mL-1的孢子浓度，供接种试验时用。
1.4 鉴定方法
采用苗期伤根与灌根相结合的室内人工接菌法。鉴定是在温湿度自动调节的科技大棚中进行，待幼苗长到3～4片真叶时，挑选苗龄一致的瓜苗用剪刀剪掉部分须根后定植于塑料花盆里，然后每个花盆浇灌先前配制好的菌液300 mL，之后将花盆放置在大棚的铁架上，温度设置为25℃，光照为自然日光。
1.5 栽培方式
丝瓜于2月底至3月初播种，采用50穴育苗盘育苗，每个品种育苗50株;定植时，各个品种随机排列，每个重复每个品种12株，定植36株，设3次重复。
1.6 调查方法
于接种30 d后按照表1分级标准调查43个丝瓜种质资源的发病情况，计算病情指数，并按照表2分级标准确定抗性等级[14]。
病情指数：DI=∑（si×ni）4N×100
式中：DI-病情指数;si-发病级别;ni-相对病级级别的株数;i-病情分级各个级;N-调查总株数。
种质群体对枯萎病的抗性依苗期病情指数分6级（表2）。
2 结果与分析
2.1 不同丝瓜种质资源农艺性状的田间调查
对不同丝瓜种质资源的农艺性状开展田间调查（表3），43个丝瓜种质资源的瓜色、瓜形、籽色、长势均有不同程度的差异。在瓜色方面，除七美-⊕10-1为墨绿和绿优-⊕13/青皮为青绿外，其余为浅绿、绿、深绿;在瓜形方面，37个为短（长）圆筒或束腰形，6个为长棍棒或长条形;在籽色方面，32个为黑籽，11个为白籽;在长势方面，除了2013-1-⊕52/重皱长势极强、武夷⊕3+⊕4合与詹⊕14长势强外，其余品种为长势处于中等至较强之间。
2.2 不同丝瓜种质资源抗病性测定与分析
对不同丝瓜种质资源的抗病性开展人工室内接菌试验，对病情指数进行调查及抗病能力进行分级（表3），结果发现接菌30 d后43个丝瓜种质资源病情指数大小不一，表明不同丝瓜种质资源抗病能力差异较大。其中，高抗有6个，病情指数为1.3～13.8，分别为春秋⊕21、台湾-⊕1+⊕2、早冠1号-⊕16/合、七美-⊕10、2012-2-1-⊕5选和2012-2-4-⊕9-5，占14.0%;抗级有21个，病情指数为16.3～29.2，分别为名家短丝瓜⊕1、武夷⊕3+⊕4合、七美2号⊕19等，占48.8%;中抗有12个，占27.9%;感病有4个，占9.3%。其中，抗级水平以上27个，占总数的62.8%。可见，43个丝瓜种质资源抗级以上占多数，感病占的比例较小，可以为丝瓜的抗病育种提供亲本材料，从而培育出优良的丝瓜新品种。
3 结论与讨论
43个丝瓜种质资源抗级以上占大多数，感病占的比例较小，可见丝瓜种质资源中大多数具有抗枯萎病基因，但与枯萎病抗性相关的抗病基因的类型、抗性机制、功能解析等还有待进一步研究。通过对丝瓜抗枯萎病资源的鉴定与评价，对抗病亲本材料进行筛选、开发和利用，根据市场需求与大众消费习惯选育出高产优质且抗病性强的丝瓜新品种，可作为苦瓜的专用嫁接砧木或鲜食使用，为丝瓜（苦瓜）产业的可持续发展奠定良好的物质基础。
由于目前福建省丝瓜种植具有区域性和多年连作等特点，在与寄主作物长期互作过程中，枯萎病菌会发生致病性变异，从而降低丝瓜品种的抗病性[15]。因此，在今后收集丝瓜种质资源时还需要对其抗性基因的类型、机制等方面开展科学研究，同时进行更加深入的分析和探究，以期培育出具有不同抗性基因的丝瓜新品种，为福建丝瓜产业的可持续发展提供物质基础和理论依据。
参考文献：
[1]吕佩珂，刘文珍，段半锁，等.中国蔬菜原色图谱续集[M].呼和浩特：远方出版社，1996.
[2]王卿，林玲.瓜类枯萎病研究进展[J].中国瓜菜，2016，29（3）：1-6.
[3]高军，高增贵，赵世波，等.瓜类枯萎病及其防治研究进展[J].长江蔬菜，2006（1）：35-38.
[4]金扬秀，谢关林.瓜类枯萎病防治研究进展[J].植物保护，2002，28（6）：43-45.
[5]李春芝.瓜类枯萎病药剂防治研究[J].现代农业科技，2010（2）：185-186，189.
[6]佘小漫，何自福，罗方芳，等.瓜类枯萎病及其综合防治技术[J].广东农业科学，2011（2）：84-86.
[7]胡振华.瓜类蔬菜病虫害特征及防治方法[J].河南农业，2018（7上）：35-37.
[8]孙庆林.几种主要蔬菜常见病害防治存在的问题及应对措施[J].农业与技术，2014，34（11）：130.
[9]敖礼林，宋孝才，饶卫华.瓜类枯萎病的综合高效防控[J].科学种养，2016（4）：35-36.
[10]金扬秀，谢关林，孙祥良，等.大蒜轮作与瓜类枯萎病发病的关系[J].上海交通大学学报（农业科学版），2003（1）：9-12.
[11]祝玲强，兰照军.瓜类枯萎病的发生及无公害综合治理技术[J].现代园艺，2007（8）：33-34.
[12]王立文，马凤科，王玉凤，等.瓜类蔬菜病虫绿色无公害防治新技术[J].上海蔬菜，2015（1）：66-68.
[13]YOSHIHISA HOMMA.日本土传病害防治现状及有关问题[J].国外农学-植物保护，1992，5（2）：20-24.
[14]方中达.植病研究方法[M].北京：中国农业出版社，2007.
[15]罗方芳，何自福，虞皓，等.广东丝瓜主要品种对枯萎病抗性的鉴定与评价[J].广东农业科学，2009（12）：49-50，63.
（责任编辑：柯文辉）
收稿日期：2021-03-20
作者简介：林永胜，男，1981年生，助理研究员，主要从事作物育种及栽培等方面研究。
通信作者：张玉灿，男，1960年生，研究员，主要从事蔬菜新品种的选育及其栽培技术等方面研究（E-mail：zyc507@sina.com）。
基金项目：福建省科技计划项目——省属公益类科研院所基本科研专项（2019R1034-8）。
关键词：丝瓜品种资源;丝瓜枯萎病;抗病性;鉴定;评价
中图分类号：S 641.2 文献标志码：A 文章编号：0253-2301（2021）05-0028-05
DOI： 10.13651/j.cnki.fjnykj.2021.05.006
Identification and Evaluation of the Resistance of 43 Luffa CylindricaGermplasm Resources to Fusarium Wilt
LIN Yong-sheng， ZHANG Wu-jun， ZHOU Xian-zhi， CHEN Yang， ZHANG Yu-can*
（Institute of Agricultural Biological Resources， Fujian Academy of Agricultural Sciences， Fuzhou， Fujian 350003， China）
Abstract： In order to breed the new varieties of Luffa cylindrica with strong disease resistance， 43 germplasm resources of Luffa cylindrica were collected from home and abroad by the research team， and the method of indoor artificial inoculation was used to identify and evaluate their resistance to fusarium wilt. The results showed that： the 6 germplasm resources of Luffa cylindrica including Chunqiu ⊕21/ baizi， 2012-2-1-⊕5 xuan， 2012-2-4-⊕9-5， Qimei-⊕10， 2012-2-1-⊕5 xuan， and 2012-2-4-⊕9-5 showed high resistance to fusarium wilt; the 21 germplasm resources of Luffa cylindrica， such as Sanyexiangnen ⊕20， Cuishuang -⊕19-2.5.6， Lvyou -⊕13/ shenlv， etc.， showed resistance to fusarium wilt; the 12 germplasm resources of Luffa cylindrica， such as Taiwan -⊕8， Mingjiaduansigua ⊕4， and 2012-2-⊕3 xuan， etc.， showed moderate resistance to fusarium wilt; and the 4 germplasm resources of Luffa cylindrica， such as Japan Zaozawang⊕11， 2012-2-⊕1-2.3， and 09-1-⊕1， etc.， were susceptible to fusarium wilt. Based on the above analysis， 27 of the 43 germplasm resources of Luffa cylindrica showed higher resistance to fusarium wilt， accounting for 62.8% of the total.
Key words： Germplasm resources of Luffa cylindrica;Fusarium wilt;Disease resistance;Identification;Evaluation
絲瓜Luffa cylindrica在我国南方地区栽培历史悠久，在全国各地均有种植，是我国夏秋季的主要蔬菜种类之一。枯萎病是丝瓜生产上的主要病害之一，又称蔓割病、萎凋病，是一种世界性的瓜类土传病害，对丝瓜的产量与品质影响很大。该病害是由尖镰孢丝瓜专化型Fusarium oxysporum Schl. f.sp.luffae Kwai Suzki et Kawai侵染所致[1]，病原菌会不断进化出新的生理小种，且能以菌核、厚垣孢子在土壤、病残体、种子中越冬，在土壤中腐生性强，能存活5年或更长的时间，使得枯萎病的防治非常困难[2]。化学防治效果普遍不佳，且大量使用容易造成环境污染和农药残留超标[3-7];与禾本科和豆科作物轮作虽然效果好，但福建省耕地面积有限，且禾本科和豆科非福建省主栽作物品种，田间实施可操作性不大[8-10];土壤改良、高温消毒和无土栽培等措施虽能有效减轻瓜类枯萎病的危害[11-13]，但通常成本较高，其田间实际应用情况较少;为此，选育和种植抗病品种是目前防治该病最有效、最经济的措施。本项目课题组对43个丝瓜种质资源开展抗枯萎病鉴定与评价，筛选出抗病性强的种质资源，为丝瓜抗病育种提供抗病亲本，并进行有针对性的抗病育种，从而有效缩短抗病育种历程，以期早日选育出抗病性强的丝瓜新品种。 1 材料与方法
1.1 试验材料
本课题组自2003年起，从国外的日本、泰国及国内的福建、台湾、湖南、海南、广东等地收集丝瓜种质资源，多数为杂交一代种子，经过17年的试种、观察、自交、纯化和定向选择，筛选出43个各具特色的丝瓜稳定自交系。
1.2 供鉴定的病原菌菌株
由福建省农业科学院农业生物资源研究所微生物中心提供，菌种名称为FJAT-32796，具有强致病性，是从福建省福州市永泰县白云乡的苦瓜枯萎病发病植株的嫁接砧木银砧1号上分离出来的。
1.3 苦瓜枯萎病鉴定用菌液的制备
先将枯萎病病菌接种于PDA培养基上，在25℃的培养箱中培养7 d，再将活化后的枯萎病菌接菌到PDA液体培养基中，然后置于 25℃、180 r·min-1振蕩培养7 d，之后再用双层纱布过滤去菌丝，以2500～3000 r·min-1 离心 10 min，去上清液，用无菌水洗出沉淀的孢子制成母液，经血球计数器将母液用无菌水调至5×106个·mL-1的孢子浓度，供接种试验时用。
1.4 鉴定方法
采用苗期伤根与灌根相结合的室内人工接菌法。鉴定是在温湿度自动调节的科技大棚中进行，待幼苗长到3～4片真叶时，挑选苗龄一致的瓜苗用剪刀剪掉部分须根后定植于塑料花盆里，然后每个花盆浇灌先前配制好的菌液300 mL，之后将花盆放置在大棚的铁架上，温度设置为25℃，光照为自然日光。
1.5 栽培方式
丝瓜于2月底至3月初播种，采用50穴育苗盘育苗，每个品种育苗50株;定植时，各个品种随机排列，每个重复每个品种12株，定植36株，设3次重复。
1.6 调查方法
于接种30 d后按照表1分级标准调查43个丝瓜种质资源的发病情况，计算病情指数，并按照表2分级标准确定抗性等级[14]。
病情指数：DI=∑（si×ni）4N×100
式中：DI-病情指数;si-发病级别;ni-相对病级级别的株数;i-病情分级各个级;N-调查总株数。
种质群体对枯萎病的抗性依苗期病情指数分6级（表2）。
2 结果与分析
2.1 不同丝瓜种质资源农艺性状的田间调查
对不同丝瓜种质资源的农艺性状开展田间调查（表3），43个丝瓜种质资源的瓜色、瓜形、籽色、长势均有不同程度的差异。在瓜色方面，除七美-⊕10-1为墨绿和绿优-⊕13/青皮为青绿外，其余为浅绿、绿、深绿;在瓜形方面，37个为短（长）圆筒或束腰形，6个为长棍棒或长条形;在籽色方面，32个为黑籽，11个为白籽;在长势方面，除了2013-1-⊕52/重皱长势极强、武夷⊕3+⊕4合与詹⊕14长势强外，其余品种为长势处于中等至较强之间。
2.2 不同丝瓜种质资源抗病性测定与分析
对不同丝瓜种质资源的抗病性开展人工室内接菌试验，对病情指数进行调查及抗病能力进行分级（表3），结果发现接菌30 d后43个丝瓜种质资源病情指数大小不一，表明不同丝瓜种质资源抗病能力差异较大。其中，高抗有6个，病情指数为1.3～13.8，分别为春秋⊕21、台湾-⊕1+⊕2、早冠1号-⊕16/合、七美-⊕10、2012-2-1-⊕5选和2012-2-4-⊕9-5，占14.0%;抗级有21个，病情指数为16.3～29.2，分别为名家短丝瓜⊕1、武夷⊕3+⊕4合、七美2号⊕19等，占48.8%;中抗有12个，占27.9%;感病有4个，占9.3%。其中，抗级水平以上27个，占总数的62.8%。可见，43个丝瓜种质资源抗级以上占多数，感病占的比例较小，可以为丝瓜的抗病育种提供亲本材料，从而培育出优良的丝瓜新品种。
3 结论与讨论
43个丝瓜种质资源抗级以上占大多数，感病占的比例较小，可见丝瓜种质资源中大多数具有抗枯萎病基因，但与枯萎病抗性相关的抗病基因的类型、抗性机制、功能解析等还有待进一步研究。通过对丝瓜抗枯萎病资源的鉴定与评价，对抗病亲本材料进行筛选、开发和利用，根据市场需求与大众消费习惯选育出高产优质且抗病性强的丝瓜新品种，可作为苦瓜的专用嫁接砧木或鲜食使用，为丝瓜（苦瓜）产业的可持续发展奠定良好的物质基础。
由于目前福建省丝瓜种植具有区域性和多年连作等特点，在与寄主作物长期互作过程中，枯萎病菌会发生致病性变异，从而降低丝瓜品种的抗病性[15]。因此，在今后收集丝瓜种质资源时还需要对其抗性基因的类型、机制等方面开展科学研究，同时进行更加深入的分析和探究，以期培育出具有不同抗性基因的丝瓜新品种，为福建丝瓜产业的可持续发展提供物质基础和理论依据。
参考文献：
[1]吕佩珂，刘文珍，段半锁，等.中国蔬菜原色图谱续集[M].呼和浩特：远方出版社，1996.
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[7]胡振华.瓜类蔬菜病虫害特征及防治方法[J].河南农业，2018（7上）：35-37.
[8]孙庆林.几种主要蔬菜常见病害防治存在的问题及应对措施[J].农业与技术，2014，34（11）：130.
[9]敖礼林，宋孝才，饶卫华.瓜类枯萎病的综合高效防控[J].科学种养，2016（4）：35-36.
[10]金扬秀，谢关林，孙祥良，等.大蒜轮作与瓜类枯萎病发病的关系[J].上海交通大学学报（农业科学版），2003（1）：9-12.
[11]祝玲强，兰照军.瓜类枯萎病的发生及无公害综合治理技术[J].现代园艺，2007（8）：33-34.
[12]王立文，马凤科，王玉凤，等.瓜类蔬菜病虫绿色无公害防治新技术[J].上海蔬菜，2015（1）：66-68.
[13]YOSHIHISA HOMMA.日本土传病害防治现状及有关问题[J].国外农学-植物保护，1992，5（2）：20-24.
[14]方中达.植病研究方法[M].北京：中国农业出版社，2007.
[15]罗方芳，何自福，虞皓，等.广东丝瓜主要品种对枯萎病抗性的鉴定与评价[J].广东农业科学，2009（12）：49-50，63.
（责任编辑：柯文辉）
收稿日期：2021-03-20
作者简介：林永胜，男，1981年生，助理研究员，主要从事作物育种及栽培等方面研究。
通信作者：张玉灿，男，1960年生，研究员，主要从事蔬菜新品种的选育及其栽培技术等方面研究（E-mail：zyc507@sina.com）。
基金项目：福建省科技计划项目——省属公益类科研院所基本科研专项（2019R1034-8）。