【摘 要】
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从鸡源空肠弯曲菌中提取共同抗原成分,用SDS-PAGE和Western blot进行分析.结果表明,抗空肠弯曲菌共同抗原的单克隆抗体4A7可与共同抗原中62000的蛋白带发生特异免疫反应.为获
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从鸡源空肠弯曲菌中提取共同抗原成分,用SDS-PAGE和Western blot进行分析.结果表明,抗空肠弯曲菌共同抗原的单克隆抗体4A7可与共同抗原中62000的蛋白带发生特异免疫反应.为获得编码这种蛋白的特异基因,从空肠弯曲菌中提取和纯化染色体基因组DNA,用EcoRⅠ和Hind Ⅲ双酶切,从酶切产物的琼脂糖电泳中回收1～2kb的DNA片段,与用相同酶切的pBluescriptⅡ KS(+)质粒进行重组连接,共挑选出420个插入外源片段大小较为适中的重组子,从而初步建立了可能含有编码空肠弯曲菌共同抗原62000蛋白成分基因片段的重组质粒基因文库.从该文库中用双酶切获取扩增的插入外源基因片段,与双酶切的pE T28a(+)质粒进行连接,转化受体菌后,以IPTG诱导表达,用4A7单抗作探针进行免疫筛选,共筛选出6个可与该单抗发生特异反应的阳性克隆.表明这些重组转化子表达了空肠弯曲菌的共同抗原成分.
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