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恶性疟原虫顶端膜抗原—1（P.f AMA—1）基因在大肠杆菌中的表达及表达产物的纯化

来源 :寄生虫与医学昆虫学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：burningDNA

【摘 要】

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本文采用PCR方法自 P.f 基因组中扩增了编码AMA-1完整胞外域及其相应结构域的基因片段,定向克隆入原核表达载体pET-16b和pET-30a(+),经测序确证后将重组子转入BL21(DE3)进行

【作 者】

：

李珣 薛采芳 王宪锋 刘忠湘 甄荣芬 

【机 构】

：

第四军医大学病原生物学教研室

【出 处】

：

寄生虫与医学昆虫学报

【发表日期】

：

2003年1期

【关键词】

：

恶性疟原虫 顶端膜抗原-1 基因表达 亲和层析 蛋白质重折叠 Plasmodium falciparumApical membrane antigen1Gene 

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本文采用PCR方法自 P.f 基因组中扩增了编码AMA-1完整胞外域及其相应结构域的基因片段,定向克隆入原核表达载体pET-16b和pET-30a(+),经测序确证后将重组子转入BL21(DE3)进行诱导表达,用SDS PAGE鉴定,对可溶性和包涵体形式的重组蛋白分别采用天然状态和变性状态下的Ni离子亲和层析进行纯化,变性蛋白再在GSH/GSSG氧化还原条件下经透析重新折叠复性.所得纯化产物为进行有关AMA-1功能和免疫保护特性的研究提供了条件.

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